【摘 要】
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本文经过富集培养、分离纯化，从土壤初步筛选出50株产葡甘聚糖酶的菌株；通过观察平板培养基中水解圈的大小和透明程度，得到10株酶活较高的菌株；经过摇瓶复筛(用DNS法测定酶活力)，
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本文经过富集培养、分离纯化，从土壤初步筛选出50株产葡甘聚糖酶的菌株；通过观察平板培养基中水解圈的大小和透明程度，得到10株酶活较高的菌株；经过摇瓶复筛(用DNS法测定酶活力)，得到一株酶活力高、产酶较快的菌株(编号为DK3)。对DK3进行16S rDNA序列测定，并在互联网上与其它菌株的相关序列进行比对，结果显示DK3是一株成团泛菌(Pantoeaagglomerans)。
对DK3菌株所产葡甘聚糖酶的产酶条件进行了初步研究，得到的最佳培养基配方为：葡甘聚糖0.6％，硝酸钠0.3％，酵母膏0.5％，蛋白胨0.3％，MgSO<,4>·7H2O 0.5％，KCI 0.5％，K<,2>HPO<,4> 0.1％，FeSO<,4>·7H<,2>O 0.001％，pH为6.0；最佳产酶条件为：接种量1％，发酵温度37℃，摇床转速1 60rpm。在此优化条件下培养24h，菌液中的葡甘聚糖酶活力达58.54U/mL，是优化前的1.27倍。
对葡甘聚糖酶的分离纯化方法进行研究：经超滤浓缩、阴离子交换柱层析和凝胶过滤柱层析，所得酶液在SDS-PAGE电泳图谱中呈单一蛋白质区带，分子量为54kDa。
对DK3菌株所产葡甘聚糖酶的酶学性质进行了初步研究，结果表明，酶促反应的最适温度为37℃，最适pH为6.0；该酶在40℃以下较为稳定，在pH5.0～9.0相对稳定。Fe<2+>、Cu<2+>对该酶有强烈的抑制作用，EDTA有较强的抑制作用，NH<,4><+>、Mg<2+>有较弱的抑制作用，Na<+>则有较小的激活作用。对固定化细胞产葡甘聚糖酶的条件进行了初步的研究，结果表明，在培养基中加入2％CaCl<,2>，固定化细胞能反复使用4次左右，后期产酶效率降低。
对葡甘聚糖酶酶法制备葡甘低聚糖进行了初步的研究，采用反复加入固体葡甘聚糖，反复液化葡甘聚糖溶胶的方法，使葡甘低聚糖溶液的最终浓度达到24％。硅胶G薄层层析结果表明，葡甘聚糖被酶解后所得到的低聚糖的成分比较复杂。
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