【摘 要】
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粒细胞在脊椎动物的先天免疫效应中发挥至关重要的作用。正常的粒细胞发育和成熟受到一系列重要转录因子的严格调控。已经有证据表明，microRNA在正常的髓系发生中发挥重要功能
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粒细胞在脊椎动物的先天免疫效应中发挥至关重要的作用。正常的粒细胞发育和成熟受到一系列重要转录因子的严格调控。已经有证据表明，microRNA在正常的髓系发生中发挥重要功能，但是其在中性粒细胞发育和成熟中的功能有待进一步研究。我们利用锌指核酸酶技术，成功的对斑马鱼中两个旁系同源基因，miR-142a和miR-142b，实现可遗传突变。结果显示，在纯合miR-142双突变的斑马鱼中，造血特异的miR-142-3p表达完全缺失。而缺失miR-142-3p的表达导致斑马鱼胚胎期定向髓系发生过程中出现中性粒细胞数量减少，且发生异常过度成熟，二分叶或多分叶的中性粒细胞比例大幅增加，同时其响应急性炎症的迁移能力受损。此外，斑马鱼成体肾脏中髓系发生过程也受到miR-142-3p缺失的影响，产生不同寻常的过度成熟的中性粒细胞和巨噬细胞样细胞，呈现异常增大的细胞体积和降低的核质比。随着年龄的增长，miR-142-3p缺失的斑马鱼会出现慢性髓系造血衰竭，髓单核细胞群体异常减少。转录组分析的结果显示，在miR-142-3p被敲除后，斑马鱼肾髓中髓单核细胞中出现了显著的转录谱变化，尤其是异常的IFN-γ信号通路的激活。进一步机制探索表明，miR-142-3p缺失引起的中性粒细胞数量减少和异常过度成熟，主要由于IFN-γ信号通路的异常激活，特别是stat1a和irf1b的异常上调所致。总之，我们的研究揭示了造血特异的miR-142-3p在维持中性粒细胞正常发育和成熟中的新功能。
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