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伪狂犬病（Pseudorabies）又称奥捷士奇病（Aujeszky’s disease，AD），是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的包括多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病。猪是该病毒的天然宿主和贮存宿主，常为流行性感染。自1902年发现以来，伪狂犬病已在全球范围内流行，并给我国乃至全球养猪业造成了巨大的经济损失，成为严重危害养猪业的重大传染病之一，预防、控制从而最终根除该病是我国当前面临的一项艰巨任务。与同属α-疱疹病毒亚科的人单纯-疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒和牛疱疹病毒Ⅰ型等一样，PRV具有潜伏感染和神经嗜性等α-疱疹病毒的典型特征。因此，PRV对于研究α-疱疹病毒在自然宿主中的增殖与分布、神经嗜性、致病机理、免疫反应及新型疫苗效力评价等方面具有很大的优越性，颇受疱疹病毒研究学者的青睐，并成为α-疱疹病毒研究的良好模型。本研究为了建立潜伏感染动物模型，通过ELISA方法对四周龄仔猪的血清进行检测，确定仔猪为PRV阴性仔猪后购进。进栏3d后用猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗对仔猪进行首次免疫，两个星期后进行二免。同时前腔静脉采血，用中和试验检测仔猪血清抗体水平。当中和抗体效价为1：2或1：2以上时，则判为PRV抗体阳性，可以对仔猪进行攻毒。TCID50测定攻毒用的PRV标记毒株gG-／LacZ+的滴度为10-6.5／0.1mL，从而确定攻毒的量为滴鼻2 mL。攻毒后1—35d内早上和下午分别采集攻毒实验猪的鼻拭子，同时进行体温测量。通过PCR方法对PRV的gD基因进行检测，发现攻毒4d后猪不再排毒。攻毒后40d，对两头实验猪按2mg／kg的剂量肌肉注射地塞米松。为了研究PRV潜伏感染时在组织内的分布，通过颈静脉放血，在攻毒后0dpi，7dpi，14dpi，21dpi，28dpi，35dpi等分别剖杀一头实验猪。迅速取大脑、小脑、脑干、三叉神经、视神经、扁桃体、肺和肾等组织，一部分经液氮冷冻后置-80℃保存，用于DNA、RNA和蛋白质的提取与分析；另一部分放入4％多聚甲醛内固定，经系列浓度乙醇脱水，二甲苯透明，常规石蜡包埋切片，厚度为5pm。将切片分为两套，一套做常规HE染色（粘片剂为蛋白甘油），另一套做SABC染色（粘片剂为多聚赖氨酸）。SABC染色观察，结果表明，在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经、视神经和非神经组织的扁桃体、肺、肾等组织内均发现阳性细胞。阳性细胞的数量随攻毒时间的延长主要呈减少趋势，但在注射地塞米松后，阳性细胞数量增加。病毒存在于被感染细胞的细胞质和细胞核内，以细胞质为主。所设对照实验，均未见到阳性细胞。H．E染色观察显示，攻毒初期大脑出现明显的非化脓性脑炎变化；小脑内有血管反应；视神经出现萎缩；神经细胞变性、坏死；扁桃体内淋巴细胞坏死，数目减少；肺呈现间质性肺炎变化，同时肺内淋巴结内的淋巴细胞高度增生；肾脏内肾小球萎缩，淋巴细胞浸润。以上病理变化随攻毒时间延长，病变减轻。但是注射地塞米松后，病变加重。通过对两种不同染色结果进行观察、比较和分析，揭示了病毒对不同组织细胞的嗜性和时间变化规律，为PRV潜伏感染的进一步研究提供了组织学实验数据。