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目的:研究二烯丙基二硫（DADS）对DJ-1核定位高表达人白血病HL-60细胞生物学行为的影响，阐明DJ-1在细胞核内的功能，为肿瘤在临床诊断及治疗过程中提供一个潜在的治疗靶点或有效药物。方法:通过lipo fectamine2000脂质体介导的基因转染技术，将携带有DJ-1基因细胞核定位表达质粒pCMV/myc/nuc-EGFP-DJ-1转染至人白血病HL-60细胞中，G418筛选出稳定DJ-1核内高表达HL-60细胞系，用荧光显微镜观察绿色荧光信号，Western blot检测转染前后DJ-1蛋白在细胞浆、核内表达情况。转染成功后实验分三组：对照组（HL-60细胞）、空载体组及高表达组（DJ-1核定位高表达HL-60细胞），利用软琼脂集落形成实验、MTT法、流式细胞术、间接免疫荧光细胞化学实验、硝基蓝四氮唑（NBT）还原比色实验、Giemsa染色法、Transwell迁移侵袭小室实验及Western blot检测DADS对HL-60细胞增殖、周期、分化、迁移侵袭能力及核内DJ-1蛋白表达的影响。结果:1.成功建立稳定DJ-1核内高表达的HL-60细胞系。测序结果证实，DJ-1基因的细胞核定位表达质粒pCMV/myc/nuc-EGFP-DJ-1的插入序列与DJ-1全长cDNA的GenBank序列完全一致。荧光显微镜观察高表达组细胞中可见绿色荧光信号。Western blot检测高表达组细胞核内DJ-1蛋白的表达量明显增高，提示成功稳定的DJ-1核内高表达HL-60细胞株。2.DADS对DJ-1细胞核内高表达的HL-60生物学行为的影响。MTT法显示：DADS作用前，高表达组细胞生长能力明显高于对照组和空载体组细胞（P<0.05）。DADS作用后，三组细胞的增殖能力明显减弱，且高表达组细胞增值抑制率明显低于对照组和空载体组（P<0.05）。提示DADS具有抑制DJ-1核内高表达的HL-60细胞增殖的作用，并且DJ-1核内高表达可促进HL-60细胞增殖及降低DADS对HL-60细胞增殖抑制的作用。软琼脂集落形成实验显示：DADS作用前，高表达组细胞的相对集落形成率明显高于对照组和空载体组（P<0.05），DADS作用后，三组细胞相对集落形成率均减低（P<0.05）。提示DJ-1核内高表达可以促进HL-60细胞增殖，DADS具有抑制DJ-1核内高表达HL-60细胞增殖的作用。流式细胞术检测显示：DADS作用前，高表达组细胞S期百分率高于对照组和空载体组（P<0.05），高表达组细胞G1期细胞百分率明显低于对照组和空载体组（P<0.05），提示DJ-1核内高表达可促进HL-60细胞增殖作用。DADS作用后，三组细胞G1期百分率均明显提高（P<0.05），S期均明显降低（P<0.05），DADS作用后出现G1期细胞阻滞，提示DADS具有诱导HL-60细胞分化的能力。间接免疫荧光细胞化学实验显示：DADS作用前，CD11b在三组细胞表面呈弱表达，CD33在高表达组的表达量明显高于对照组和空载体组；DADS作用后，三组细胞CD11b的表达明显提高，CD33的表达明显降低，提示DJ-1核内高表达可以抑制HL-60细胞分化，DADS具有诱导DJ-1核内高表达HL-60细胞分化的作用。NBT还原反应实验：DADS作用前，高表达组细胞的还原率明显低于对照组和空载体组（P<0.05）；DADS作用后，三组细胞的还原率均明显升高（P<0.05），提示DJ-1核内高表达可以抑制HL-60细胞分化，DADS具有诱导DJ-1核内高表达HL-60细胞分化的能力。Giemsa染色法显示：与DADS作用前相比，DADS作用后，三组细胞开始出现分化现象，细胞体积减小，核出现U型、肾型和分叶改变，核浆比例降低，细胞核的染色变浅等。迁移实验显示：DADS作用前，高表达组细胞迁移率明显高于对照组和空载体组（P<0.05）；DADS作用后，三组细胞迁移能力均明显减弱（P<0.05），提示DJ-1核内高表达可以促进HL-60细胞迁移，DADS具有抑制HL-60细胞迁移的作用。侵袭实验显示：DADS作用前，高表达组细胞穿膜数较对照组和空载体组明显增多（P<0.05）；DADS作用后，三组细胞穿膜数明显减少，侵袭能力均明显减弱（P<0.05），提示DJ-1核内高表达可以促进HL-60细胞侵袭，DADS具有抑制DJ-1核内高表达HL-60细胞侵袭的能力。3.DADS对DJ-1核内高表达HL-60细胞核内DJ-1表达的影响Western blot检测：与DADS作用前相比，DADS作用后，三组细胞核内DJ-1蛋白均明显减少（P<0.05），提示DADS（1.25mg·L-1）具有抑制HL-60细胞核内DJ-1蛋白表达的能力。结论：1.DJ-1核定位高表达具有促进HL-60细胞增殖和迁移侵袭及抑制HL-60细胞分化的作用。2.DADS可以诱导DJ-1核定位高表达的HL-60细胞分化及抑制迁移侵袭。3.DJ-1核定位高表达可减弱DADS抑制HL-60细胞增殖的作用。