药用植物柴胡种子萌发特性与组织培养研究

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柴胡是伞形科柴胡属的重要药用植物,也是我国、韩国及日本等国所使用的大宗药材。北柴胡和狭叶柴胡的有效成分含量最高,其中北柴胡又高于狭叶柴胡,因此中国药典将北柴胡Bupleurum chinese DC.(又称硬苗柴胡)和狭叶柴胡B.scorzonerifolium Wild.(又称软苗柴胡、红柴胡)作为药用柴胡的原植物并列为药用柴胡的正品。北柴胡广泛分布于我国的北方地区,其质量优良,用药需求量越来越大。然而,由于多年的盲目、过度挖掘,致使野生资源日益减少,只能满足需求量的50%,其余50%需要通过人工栽培来补充,因此近年来柴胡供应的重点逐步转移到人工种植上来。很多地区正积极推进柴胡的家种生产,在山西、河北、陕西、甘肃等省已形成一定栽培规模。但由于柴胡外形相似,常常多种混生于同一产地,形态学鉴定比较困难,分类处理存在争议。经调查,北柴胡各产地均存在不同程度的品种混杂生长现象,既有北柴胡种下的不同变型,也有形态易混的近缘种,更有引种栽培后出现的各种形态变异,造成了北柴胡药材的种质不纯、品种混杂,质量下降和参差不齐,影响到临床用药的准确性和中成药疗效的稳定性,以致影响到中国出口柴胡的声誉。 本实验根据柴胡种子的特性,通过对保存时间不同的红柴胡种子的生活力及发芽率进行测定和分析,确定了红柴胡种子发芽的适宜条件;以从田间直接采集的北柴胡和三岛柴胡为实验材料,进行了北柴胡茎段、叶片、叶柄、花芽等外植体的组织培养和三岛柴胡叶愈伤组织的诱导;研究了快速繁殖技术的建立和器官发生过程;探讨了不同的基本培养基和外源激素在柴胡愈伤组织形成、快速繁殖过程中的作用;应用石蜡切片法对不同产地的北柴胡的根和叶进行了显微结构观察和比较。 应用TTC种子生活力快速测定法对柴胡种子生活力的测定结果表明:红柴胡当年种子发芽最适温度为20℃,发芽率为40.2%;3%的H2O2水溶液浸种1天可以显著提高红柴胡种子的发芽率,其发芽率上升为52.5%。隔年红柴胡种子基本丧失发芽力。 通过对北柴胡叶、茎、花芽和三岛柴胡叶愈伤组织的诱导发现,2,4-D是影响柴胡愈伤组织诱导率主要外源激素。柴胡幼茎和花芽是诱导愈伤
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