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研究目的: 卵巢癌是妇科致命的妇科恶性肿瘤，由于其发病隐匿，缺少特异可靠的筛查诊断指标，发现时往往已是晚期。转移是卵巢癌患者死亡的主要原因。应激与肿瘤的关系的研究越来越受到关注。应激包括患者因患肿瘤引发的心理应激被认为能促进肿瘤的进展。糖皮质激素(GC)是重要的应激激素，具有强大的免疫抑制、抗炎和维持内环境稳定的作用，并能在其受体(GR)的介导下调节细胞的新陈代谢、分化、增殖及存活。此外GC还是临床广泛使用的药物。除了治疗自身免疫性疾病和炎症外，还被作为实体肿瘤/癌症的化疗或放疗的辅助药物，用来减少放化疗的副反应，增加患者的耐受性。尽管GC与肿瘤的关系的研究一直受到关注，但结果一直不明确。研究证实GC可抑制一些实体肿瘤的增殖和进展，因此，有将GC单药或者联合细胞毒性药物（如5氟尿嘧啶）治疗乳腺癌和前列腺癌，并取得了一定的效果。反之近年来对多种肿瘤的研究表明，GC可以增强肿瘤细胞对放化疗的抵抗，减少放化疗诱导的细胞凋亡，促进肿瘤细胞存活，而这些作用加上GC的免疫抑制作用则有助于肿瘤的发生和发展。因此GC对肿瘤的作用还不清楚，其作用是否因肿瘤的不同类型而异需要进一步研究。 缺氧是肿瘤常见微环境特征之一，低氧可诱导低氧诱导因子HIF-1的表达。HIF-1是重要的转录因子，由HIF-1α和HIF-1β组成，其中α亚基为氧调节亚基。HIF-1α表达增加被认为与临床上肿瘤患者预后不良相关。研究表明卵巢痛组织中HIF-1α的表达明显高于正常卵巢组织;并且HIF-1α在卵巢癌组织中的表达水平高与卵巢癌患者的预后差呈正相关。近年来研究认为HIF-1α的高表达促进多种肿瘤细胞的迁移和侵袭，因此HIF1-α已经成为几种类型肿瘤进展的关键预测因子。而HIF-1α对卵巢癌细胞侵袭和迁移的研究较少，现有的研究亦认为缺氧下HIF-1α促进卵巢癌细胞的侵袭转移。 MUC1是一种跨膜黏蛋白，常过表达于一些上皮肿瘤，能够与膜上的多种蛋白相互作用，激活细胞内的PI-3K/AKT通路、Wnt通路等多条信号转导通路，从而调节细胞的侵袭转移等。近年来，MUC1被当作一种新的低氧诱导因子受到人们的关注，有报道MUC1与HIF-1α之间存在相互作用，但确切作用机制还不清楚。小G蛋白Rho激活的蛋白激酶ROCK2作为一个下游信号通路分子可通过调节细胞骨架进而调节细胞运动，与肿瘤细胞的转移密切相关。有国外学者在其研究中发现，Rho/ROCK途径可以调节HIF-1α信号转导。 我校病生教研室前期的研究发现GC在体内和体外可以明显促进卵巢癌细胞的迁移、侵袭和转移，并且GC可以上调卵巢癌细胞中MUC1及ROCK2的表达。本课题在此基础上进一步探讨GC是否能影响卵巢癌细胞中HIF-1α信号通路进而促进卵巢癌细胞的迁移，并且探讨其可能的机制，主要观察了MUC1和ROCK2与GC增加HIF-1α蛋白进而促进卵巢癌细胞迁移中的作用的关系。 研究方法: 我们在细胞水平进行实验，以卵巢癌细胞系HO-8910、SKOV3为研究对象，实验过程中用含10％去激素血清的1640培养基培养细胞，去除血清中的激素对细胞的影响，用100nM DEX对细胞处理不同的时间。用Western Blot的方法检测HIF-1α蛋白的表达水平。siRNA干扰实验分别对HIF-1α、MUC1的表达进行干扰，继而使用Western Blot的方法验证MUC1、ROCK2及HIF-1α的表达。利用Transwell小室检测卵巢癌细胞的垂直迁移能力。 研究结果: 1.DEX可以明显上调卵巢癌细胞中HIF-1α蛋白的表达，干扰HIF-1α的表达明显阻断DEX促卵巢癌细胞迁移的作用。 2.DEX能上调卵巢癌细胞中MUC1的表达，干扰MUC1的表达不仅可以明显阻断DEX促卵巢癌细胞迁移的作用，也能明显阻断DEX上调HIF-1α的作用;反之干扰HIF-1α却不影响DEX诱导MUC1表达的作用。 3.干扰HIF-1α并不影响DEX上调ROCK2的表达。 研究结论： DEX能明显增加卵巢癌细胞中HIF-1α蛋白的表达水平，该作用与Dex上调MUC1的表达密切相关。DEX上调MUC1进而增加HIF-1α在DEX促进卵巢癌细胞迁移中具有重要作用。