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背景T细胞非霍奇金淋巴瘤(T cell non-Hodgkin lymphoma,T-NHL)是一组异质性疾病,其恶性程度高,5年总生存率仅为20-40%。目前常规治疗方案都易复发,并且一旦复发缺乏有效的挽救治疗方案。因此积极推动T-NHL临床研究,探究其发病机制及药物靶点应当成为淋巴瘤研究的重点。肿瘤微环境和肿瘤相关免疫是近年的研究和治疗热点,外周血循环淋巴细胞是肿瘤患者机体免疫系统的重要组成部分,已有研究证实淋巴瘤患者外周血T细胞表面的共刺激分子中常存在异常表达,与肿瘤的免疫逃逸相关。其中程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)与肿瘤免疫关系最为密切,然而循环淋巴细胞表面PD-1在T-NHL中的研究相对较少,本文对PD-1对于T-NHL患者的机体免疫的影响及作用进行初步探讨。目的1.明确PD-1及相关共刺激分子在初治T-NHL外周血Treg细胞表面的表达及其治疗后变化。2.探究T-NHL患者与健康人外周血PD-1(+)淋巴细胞功能的差异性。3.初步揭示T-NHL患者外周血PD-1(+)淋巴细胞功能差异性的分子基础。方法本研究共纳入2015年9月至2017年4月在北京协和医院诊治的60例T-NHL患者,和在健康体检中心查体的65名健康志愿者。采用流式细胞技术分析外周血Treg细胞表面PD-1及相关共刺激分子的表达水平,分析表达与患者预后间的关系。并在患者治疗第2-6疗程后,再次测定患者外周血T淋巴细胞表面PD-1及相关共刺激分子的表达情况,探究表达与患者疗效的关系。利用磁珠分选10例初治T-NHL及10例健康受试者的外周血PD-1(+)淋巴细胞,进行体外培养,采用MTT试验对比患者及健康受试者外周血PD-1(+)淋巴细胞功能,此外利用数字化基因表达谱测序技术分析患者及健康受试者外周血PD-1(+)淋巴细胞基因表达谱差异,探究功能差异的分子基础。结果1.1)初治T-NHL患者外周血Treg细胞表面CD279及CD152平均荧光强度较健康对照组明显升高(P<0.001);CD152及CD28表达比例较健康对照明显降低(P<0.001);2)中/高危患者外周血Treg细胞表面CD279及CD152平均荧光强度较低危患者组明显升高(P<0.05),CD28表达比例较低危患者组明显降低(P<0.05);3)血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤患者外周血Treg细胞表面CD279及CD28表达平均荧光强度较结外NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)患者明显降低(PP<0.05);4)T-NHL患者治疗后外周血Treg细胞表面CD279及CD152平均荧光强度较治疗前明显降低(P<0.05),CD28平均荧光强度较治疗前明显升高(P<0.05)。5)T-NHL患者外周血Treg细胞表面PD-1及CD152表达与患者无事件生存时间相关(P<0.05)。2.T-NHL患者外周血PD-1(+)淋巴细胞转化率低于健康受试者(P<0.001)。3.与健康对照相比,T-NHL患者外周血PD-1(+)淋巴细胞具有明显不同的基因表达谱,与差异基因相关的生物学过程包括细胞增殖/凋亡、免疫反应、信号传导、物质代谢及细胞粘附等,主要涉及IFN、MYD88以及Toll样受体相关通路。结论1、初治T-NHL患者外周血Treg表面PD-1及相关共刺激分子表达较健康人具有明显差异,与疾病分层及预后相关;经过治疗后,T-NHL患者外周血Treg细胞表面PD-1及相关共刺激分子表达向健康人水平转变。2、T-NHL患者外周血PD-1(+)淋巴细胞功能较健康人明显减弱。3、T-NHL患者外周血PD-1(+)淋巴细胞较健康人基因表达谱具有明显差异,差异表达的基因可能与T-NHL的发生及肿瘤免疫相关。