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目的:建立体外培养神经细胞和大鼠创伤性脑损伤动物模型,研究损伤后培养神经细胞形态学改变和大鼠海马蛋白质组表达情况,寻找差异性生物标志蛋白。方法:选新生24小时内SD大鼠,取海马组织,培养10-14天后,随机分为对照组及损伤后4h、8h、12h、24h和48h组,复制Scott’s神经细胞液压冲击损伤模型,进行神经细胞形态学观察。选成年雄性SD大鼠随机分为手术对照组及损伤后4h、8h、12h、24h和48h组,复制Marmarou’s落体打击大鼠脑损伤模型,采用双向凝胶电泳技术分析大鼠闭合性脑损伤后不同时间海马中蛋白质组表达的改变。结果:1体外培养神经细胞液压冲击损伤装置稳定性评价:通过记录小室内和有机玻璃管内的压力大小来检测液压冲击损伤压力的大小,结果表明,小室内和有机管内的压力存在一线性关系(Y=4.4763X+0.2986,Y代表有机玻璃管内压力,X代表小室内压力),造成细胞损伤力的大小以小室内的压力为准。有机玻璃管和小室内压力随钟摆打击角度的增加而增大。轻(0.1MPa)、中(0.2MPa)和重度(0.3MPa)液压冲击损伤所需钟摆下落角度分别为13.5°、21.5°和27°。2液压冲击损伤神经细胞形态学改变:液压冲击后,神经细胞甲苯胺蓝染色,正常神经细胞胞核呈蓝色,胞浆染成淡蓝色,损伤组培养神经细胞主要表现为部分神经细胞胞体浓缩,胞核固缩,染色较深,呈深蓝色,多为坏死型损伤细胞,