论文部分内容阅读
人参属植物属于五加科植物(Panax ginseng C.A.Mey)的一属,其产地始于地史第三纪古热带地区的山区的"东亚-北美"、中国的西南部地区、亚洲东部地区和北美洲。其中,人参的道地产地主要分布在中国的东北三省、朝鲜的北部地区等以及被第四纪冰川所覆盖的属于北美洲的部分地区,导致现在只有西洋参和三叶参。而植物三七的分布范围相对于人参和西洋参来说极其狭小,主要分布于中国的云南省、广西省、四川省等地域。人参在人参属中是非常重要的植物之一,同时也是是滋补佳品,它的成分含量非常复杂,富含人参皂苷、人参多糖、人参蛋白质、氨基酸、黄酮类等物质[1]。现代药理学研究表明,人参皂苷(Ginsenoside,GS)被证明是人参众多成分中的最重要的的有效成分,目前已经得到研究人员准确证实的人参皂苷单体已有40多种,其具有多种现代药理活性[2]。目前在世界范围内引起了广泛的使用,主要用于制药、食品保健和美容护肤等方面。由于人参广泛药理作用,本课题组在1990年发现人参皂苷T19后,多年来对其进行了一系列更加深入的研究。通过研究发现其具有非常好的降血糖活性,因此,想对其进行水解工艺研究提高其在原植物中的含量,从而进行大量制备,得到的T19对人参属植物进行新的药用资源的利用及开发都具有非常重要的社会和经济意义。本实验是在前期多年对人参属的植物中化学成分以及药理活性研究结果的基础上,首次建立了达玛烷型原人参三醇皂苷成分的含量测定。HPLC-ELSD分析实验中所使用的色谱柱型号为Agilent C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相使用的是甲醇-水系统,体积比为70:30进行洗脱,流动相流速是1.0mL/min;蒸发光检测器的气化室温度为87.0℃,载气流速根据蒸发光检测器的要求设定为2.20 L/min;每次进样体积为10.0 μL进行检测。实验结果表明,本实验所建立的实验方法中原人参三醇皂苷成分线性关系良好,专属性强、精密度高、重复性好、稳定性佳、加样回收率均符合要求,可用于人参属植物中上述达玛烷型原人参三醇皂苷成分的含量测定。本实验同时通过水解人参茎叶总皂苷,优选酸水解工艺,提高原植物中的人参皂苷原三醇组皂苷T19的含量。运用单因素实验和正交实验,筛选出酸水解制备20(R)-T19的最佳实验方案。实验结果发现,影响人参茎叶酸水解的的主次因素依次是反应温度>反应时间>盐酸量>甲醇量>盐酸浓度,优选得到的最佳酸水解工艺是甲醇加入量为3.0ml,盐酸加入量为15.0 ml,盐酸浓度为60.0%,反应温度为35.0 ℃,反应时间为2.0 h。本实验利用上述实验得到的最优工艺进行放大实验,之后利用硅胶柱层次洗脱,分离纯化得到T19纯品。柱层析洗脱条件为二氯甲烷:乙醇=12:1,使T19的Rf值在0.3左右。薄层检测展开剂为二氯甲烷:乙醇=10:1,T19的Rf值在0.5左右。经过多次柱层析分离纯化,得到T19纯品纯度均大于95%,收率约为4.96%。