几种兰科植物组织培养及菌根真菌的研究

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兰科植物作为一种重要的植物资源,具有巨大的经济价值和科研价值。菌根真菌对于自然状态下兰科植物完成正常的生活史具有不可替代的生物作用,因此从菌根真菌的角度研究珍稀濒危兰科植物的保育十分重要。本研究旨在探索兰花快速繁殖技术,并通过人工接种促使组培苗菌根化,提高移栽成活率,保证兰花组培苗的正常生长发育。本研究主要包括兰科植物的组织培养;促进象牙白(Cymbidium eburneum)原球茎生长、不定芽分化的真菌诱导子及组合的筛选;促进美花兰(Cymbidium insigne)苗生长的菌根菌的筛选及菌根结构的观察;以及实验所用菌株鉴定的研究。具体结果如下:1、在春兰原球茎增殖诱导的过程中发现,以KC附加1.0mg/L的NAA(α-萘乙酸)效果最好。在象牙白原球茎增殖过程中,1/2MS培养基分化生长的象牙白组培苗生长健壮,有利于成活。2、将不同的菌根真菌制成诱导子,加入象牙白原球茎的培养基中进行诱导培养。在生物量的增长方面,不同真菌诱导子的作用强度依次为HF26>CF6>CF8>CF3。3、将由不同真菌制备成的真菌诱导子和诱导子组合加入象牙白组培苗生长的培养基上,进行诱导培养。与对照相比,生物量增加以DMF80和H+C菌株效果最好,且DMF80菌株与对照在鲜重增加量上达到极显著差异。HF26菌株在促进叶片和根的分化上优于其他菌株,而DMF80菌株最有利于基生根的形成;在多糖含量的积累上,诱导子组合表现出极大的促进作用。4、将美花兰组培苗与7菌株进行共生培养,结果表明:接种CF2、CF8、DMF80菌株的组培苗鲜重增长率达到了显著差异水平。结合石蜡切片的观察结果及该菌的再分离结果,认为这3菌株已与美花兰组培苗形成了良好的共生体系。5、通过对美花兰菌根切片的显微结构观察,表明美花兰具有典型的兰科菌根结构:菌丝通过破坏根被和外皮层细胞进入皮层;菌丝结不均匀的分布在皮层细胞中,且较外侧的几层细胞中分布较多;菌丝结常出现在细胞核附近或与之缠绕成一团;菌丝通过穿透细胞壁来侵染其它细胞,并再次形成菌丝结。皮层细胞中分布着大量的菌丝团和消解的菌丝,它们的不断形成和消解提供了兰科植物生长所需要的营养。6、对研究中所用到的部分菌根真菌进行鉴定,供试的7菌株分别隶属于7个属:角菌根菌属(Ceratorhiza)、曲霉属(Aspergillus)、伞状霉属(Umbelopsis)、交链孢属(Alternaria)、毛壳菌属(Chaetomium)、镰孢属(Fusarium)、瘤菌根菌属(Epulorhiza)。
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