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研究背景及目的：胰腺导管腺癌（Pancreatic ductAladenocarcinoma,PDAC）预后差，由于胰腺解剖位置特殊，起病隐匿，当其发生恶性肿瘤时，早期诊断困难，大多患者确诊时已为中、晚期而失去手术机会，手术切除率低。微小RNA（microRNA,miRNA）与肿瘤的相关研究越来越得到关注，研究发现miRNA为肿瘤的诊断和治疗带来新思路，miRNA 具有癌基因或抑癌基因的功能，广泛参与肿瘤的发生发展过程。本研究目的是探讨PDAC的miRNA表达谱，并对差异表达的microRNA作为血清诊断标志物的可能性及其功能进行初步研究。
材料与方法：①首先用miRNA 芯片检测9例胰腺癌组织和3例正常胰腺组织中miRNA表达谱情况并进行验证；②应用LNA-核酸原位杂交的方法，检测在胰腺癌中高表达的miRNA-194在5例人PDAC组织和6例荷人胰腺癌组织SCID 鼠移植瘤中的表达情况；③应用Real-time PCR 方法分别检测70例胰腺癌、12例十二指肠腺癌和40例健康人血清中miRNA-194的表达情况；④Real-time PCR的方法检测6株胰腺癌细胞株及其上清中的miRNA-194表达水平，同时检测了10例荷人胰腺癌SCID 鼠和对照组血清中miRNA-194的表达；⑤应用miR-194 慢病毒载体感染胰腺癌细胞株，通过MTT 法测定细胞生长、平板克隆实验、细胞凋亡、划痕试验和裸鼠胰腺原位成瘤等实验初步探讨miRNA-194的功能。
结果：①与正常胰腺比较，胰腺癌组织中有8个miRNA 高表达，8个miRNA低表达；②31例PDAC组织与癌旁胰腺比较，miR-194及miR-194*均上调表达（P=0.001，P=0.022），LNA-核酸原位杂交结果显示miR-194 定位于PDAC 肿瘤细胞的细胞浆；③miR-194在6株胰腺癌细胞和其培养上清中的表达具有高度一致性（r=0.806，p=0.000）；转移灶建株的胰腺癌细胞株（Capan-1、AsPC-1、SW1990）
miR-194的表达水平高于胰腺原位肿瘤建株的胰腺癌细胞株（Miapaca-2、PANC-1、BxPC-3）；④PDAC患者血清中miR-194 含量与十二指肠患者和健康对照比较显著升高（P<0.05），ROC分析示曲线下面积(AUC)为0.571，敏感性和特异性分别为54.3％和57.5％；与对照组比较，miR-194在荷瘤SCID 鼠血清中显著升高（P=0.003）；⑤miR-194 抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤细胞的生长、增殖、迁移和侵袭。
结论：① PDAC 有其特异的miRNA表达谱，miR-194与PDAC的关系密切；
②血清中的miRNA-194 可能来自肿瘤细胞，miR-194 单独或联合其他miRNA 可作为PDAC 潜在的血清诊断标志物；③miR-194 促进PDAC的恶性生物学行为，miR-194可能成为PDAC 诊断和治疗的新的分子靶标。研究背景及目的：肿瘤的发生、发展及侵袭转移演变的过程取决于机体内肿瘤和宿主的相互作用，二者的关系成为近年来肿瘤研究的热点，而肿瘤免疫微环境作为其中的重点内容日益受到关注。PDAC及其癌旁组织中常伴随慢性炎症，炎症细胞散在分布，并包绕周围神经形成套样结构，而当肿瘤细胞侵犯神经时，神经周围淋巴单核样细胞套消失。因此，在PDAC的免疫微环境中，免疫活性细胞的免疫逃逸可能在PDAC 侵袭转移过程中发挥重要作用。本实验目的是初步探讨在PDAC免疫微环境中，免疫细胞介导的肿瘤免疫逃逸的作用和机制。
材料与方法：首先通过免疫组织化学方法对富含神经周围淋巴单核细胞套的10例慢性胰腺炎和10例PDAC 癌旁组织进行T、B 淋巴细胞分型，应用流式细胞术对27例术前PDAC患者、7例慢性胰腺炎和4例健康人外周血的免疫活性细胞进行分选，最后用免疫荧光双标记观察了30例胰腺导管腺癌组织和5例慢性胰腺炎组织中免疫细胞的原位分布。
结果：①神经周淋巴单核细胞套主要由T、B细胞组成，且二者分布无明显优势效应(P>0.05)；②胰腺癌外周血中CD13+CD16+CD15-髓源性细胞占单个核细胞比例明显高于慢性胰腺炎和正常对照组（P<0.05）；胰腺癌术后患者外周血中CD13+CD16+CD15-髓源性细胞比例明显降低（P<0.05）；③CD13+CD16+CD15-髓源性细胞在神经周围淋巴单核细胞套中呈散在分布；且CD13+CD16+CD15-髓源性细胞在PDAC组织中大量分布（15.58±9.90/HPF）（n=30）；
结论：①研究显示从淋巴单核样细胞套形成到PDAC的神经浸润可能是连续性的过程；PDAC中淋巴单核细胞套的消失与免疫逃逸相关；② CD13+CD16+CD15-髓源性细胞可能作为预测诊断和预后的潜在生物标记；③ CD13+CD16+CD15-髓源性细胞与PDAC 恶性生物学行为密切相关，可能介导的免疫逃逸参与了PDAC的发生和进展。