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目的:1.对安徽省各个地区的五叶木通进行资源调查,初步掌握安徽省内五叶木通的资源分布情况,并对气候环境进行初步分析。2.建立安徽省各地五叶木通指纹图谱测定方法,为五叶木通质量控制标准的建立提供依据。3.建立不同产地、不同季节的五叶木通质量分析方法,初步了解安徽省各地五叶木通的质量和适宜采收季节。4.通过对五叶木通的组织化学研究,及不同直径、不同部位的有效成分含量检测,阐明五叶木通中三萜皂苷类活性成分在不同组织结构中的分布规律以及不同直径中的积累变化特征。方法:1.利用地理信息系统对各地木通资源进行分析,并通过多种气候指标对中药木通生长的气候环境进行分析。2.利用超高效液相色谱法建立不同产地的五叶木通的指纹图谱。3.利用超高效液相色谱法对不同产地、不同季节的五叶木通中有效成分的含量进行检测。4.利用香草醛-冰醋酸和高氯酸混合试剂显色的方法,对五叶木通中的三萜皂苷类有效成分进行组织定位,利用高效液相色谱法对不同组织结构及不同直径的五叶木通中三种有效成分进行含量测定。5.利用超高效液相色谱/四极杆串联飞行时间质谱联用技术对五叶木通中化学成分进行定性分析。结果:1.通过资源调查结果,运用地理信息系统构建了安徽省中药木通资源分布图,发现木通属三种植物主要分布在安徽省江淮丘陵地区,皖南山区和大别山区,野生资源相当丰富,其中五叶木通的野生资源蕴藏量更丰富,分布范围更广泛,尤以江淮丘陵地区最为丰富。对安徽省境内的气候指标进行主成分分析发现年平均气温、最冷月平均气温、极端最低气温、生物温度、徐文铎湿度指数、可能蒸散率和≥10℃积温,这7中气候因素对当地气候环境影响最大。2.建立安徽省各地18批五叶木通样品的指纹图谱,对实验进行了精密度、稳定性、重复性方面的考察,结果表明此五叶木通指纹图谱方法可行,所建立的指纹图谱符合中药指纹图谱建立的技术要求。根据相对保留时间确定了20个共有峰,并对色谱图进行了相似度计算,发现共有14批样品的相似度计算结果在0.90以上,另有4批样品相似度计算结果在0.80以上,说明各地五叶木通的质量总体上相近,运用聚类计算对样品相对峰面积的欧氏距离,可以将18批样品大致分为两类:江淮丘陵中西部地区和大别山区、江淮丘陵东部地区和皖南山区;主成分分析发现木通苯乙醇苷B和齐墩果酸对五叶木通的质量有重要影响。3.以α-常春藤皂苷、木通苯乙醇苷B、齐墩果酸为检测指标,对不同产地和季节的五叶木通进行质量分析,发现不同产地五叶木通中木通苯乙醇苷B含量随采收时间成正比增加,α-常春藤皂苷、齐墩果酸则无明显变化。4.组织化学定位结果显示,五叶木通藤茎中皮层细胞染成紫红色,木栓层、韧皮部细胞染成淡红色,中柱鞘、木质部细胞染成橙黄色,含晶细胞层和髓部未发生显色反应。颜色变化由深到浅依次为:皮层、木栓层、次生木质部。木通苯乙醇苷B含量初始随着直径的增大而呈上升趋势,在0.9 cm时含量达到最高,而后随着直径的增加含量呈逐渐降低趋势。常春藤皂苷元和齐墩果酸的含量则与木通直径呈反比。3种有效成分在次生木质部、次生韧皮部和木栓层的含量分布呈现由高到低的顺序。5.通过建立五叶木通化学成分数据库结合UNIFI分析软件,对负离子模式下的五叶木通总离子流图中的各个分子离子峰进行筛选和鉴别,确定了其中38个峰的可能的结构,其中有32个为三萜或三萜皂苷类化合。结论:五叶木通分布在安徽省各地,尤以江淮丘陵地区资源分布广且量大,气候条件最为适宜。五叶木通的资源分为江淮丘陵中西部和大别山、江淮丘陵东部和皖南山区两类,以江淮丘陵地区的五叶木通质量较为稳定,且品质优良,研究发现八、九月份采收的直径在0.9cm的五叶木通质量最佳。