【摘 要】
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目的:通过在体外进行细胞实验,采用特定手段干预培养的大鼠HSC,观察血管紧张素Ang(1-7)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的HSC中其Mas受体(MasR)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3
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目的:通过在体外进行细胞实验,采用特定手段干预培养的大鼠HSC,观察血管紧张素Ang(1-7)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的HSC中其Mas受体(MasR)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,进而探讨Ang(1-7)在肝纤维化进程中的作用以及其可能的作用机制,将会为肝组织纤维化形成和治疗奠定新的理论基础。方法:HSC-T6被予以体外孵育。将其分为正常对照组、不同浓度AngⅡ处理组、AngⅡ+Ang(1-7)组、AngⅡ+Ang(1-7)+Mas受体拮抗剂(A779)组,共6组。共同孵育培养24h后,采用流式AnnexinV/PI双染的方法测定不同组别细胞的凋亡率;同时采用Real-time PCR、Western Blotting两种方法分别检测HSC中Mas R、TGF-β1、Smad3及CTGF mRNA及对应蛋白质的表达含量。结果:(1)和正常组对照,AngⅡ处理组HSC中MasR、TGF-β1、Smad3、CTGF的mRNA及蛋白质的表达量增加(P<0.05)。(2)与AngⅡ处理组相比,AngⅡ+Ang(1-7)组HSC的凋亡率增加,而TGF-β1、Smad3、CTGF mRNA表达降低,Mas受体表达量增加(P<0.05)。(3)与AngⅡ+Ang(1-7)组相比,AngⅡ+Ang(1-7)+Mas受体拮抗剂A779组,HSC的凋亡率降低,TGF-β1、Smad3、CTGF mRNA及蛋白质的表达增加(P<0.05),Mas受体表达水平降低(P<0.05)。结论:动物HSC能够被AngⅡ诱导激活,促使TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加。Ang(1-7)可促使AngⅡ诱导的HSC凋亡而发挥拮抗肝纤维化作用,其主要是通过和Mas受体(MasR)结合,进而对抗AngⅡ的作用,具体作用机制可能与下调TGF-β1/Smad3信号转导通路有关。
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