论文部分内容阅读
[目的]
研究c-Jun及相关基因在鼻咽癌中的表达;研究c-Jun信号通路阻滞剂SP600125对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制;探讨EB病毒LMP1基因对鼻咽癌细胞增殖凋亡和c-Jun表达的影响。
[方法]
1.采用免疫组化SP法检测42例鼻咽癌、28例鼻咽粘膜慢性炎组织中LMP1、c-Jun、磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和Survivin、Ki67蛋白的表达。
2.体外培养人低分化鼻咽癌细胞系CNE2Z、人高分化鼻咽癌细胞系CNE1及转染了EB病毒LMP1基因的CNE1细胞——CNE1-GL细胞,不同剂量的c-Jun抑制剂SP600125作用于鼻咽癌CNE2Z细胞。通过MTT法检测细胞增殖;流式细胞术;RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学方法检测LMP-1、p-c-Jun、c-Jun、Survivin和Ki67 mRNA以及蛋白的表达。
[结果]
1.免疫组化结果显示,鼻咽癌组织中LMP1、c-Jun、p-c-Jun、Survivin和Ki67蛋白的阳性率均高于鼻咽粘膜慢性炎组织(P＜0.01)。相关分析结果显示,LMP1和c-Jun、LMP1和p-c-Jun、c-Jun和Survivin、c-Jun和P-c-Jun表达之间呈正相关(r值分别为0.361、0.337、0.358和0.355,P＜0.05)。
2.与CNE1细胞相比,CNE1-GL c-Jun活化程度增加,Survivin基因表达上调。
3.SP600125可明显抑制CNE2Z细胞生长,凋亡率增加,c-Jun活化程度降低,Survivin、Ki67基因表达下调。
[结论]
1.鼻咽癌中存在c-Jun蛋白高表达和持续激活,c-Jun可能通过调节Survivin基因表达参与鼻咽癌的发生发展,LMP1基因可能参与c-Jun的活化。
2.EB病毒LMP1基因导入可使c-Jun活化程度增加,对细胞凋亡无影响。
3.阻断c-Jun(JNK)信号通路可抑制CNE2Z细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Survivin表达,使细胞凋亡增加。