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恶性肿瘤的诱导分化治疗是近年不断发展的一种新的治疗手段，已在血液病中获得巨大的成功，但在实体瘤中发展缓慢，寻找实体瘤诱导分化标志物已成为近年研究的难点和热点。口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)占口腔癌发病率的80％～90％，尽管外科技术和辅助治疗的发展患者五年存活率不到50％。全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)在急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukenmia，APL)的诱导分化治疗中已获得成功，近年发现三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)对APL具有非常显著的疗效，并且对ATRA或常规化疗耐药的病人仍然有效，同时发现对实体瘤细胞亦有诱导分化作用。成人不同部位上皮角蛋白基本上是恒定的，当细胞出现恶性转化时，细胞角蛋白(cytokertin，CK)13逐渐减少，至鳞癌阶段，几乎见不到CK13阳性细胞。因此，选取ATRA和As2O3作为诱导分化剂，进行口腔鳞癌体外诱导分化的研究。
材料和方法:采用MTT法观察诱导分化剂ATRA和As2O3对三种口腔鳞癌细胞KB、Tca83和Tca8113药物化学敏感程度；流式细胞术分析ATRA和As2O3对药物化学敏感的口腔鳞癌细胞诱导分化后细胞周期的改变和药物对癌细胞增殖的抑制率；免疫荧光技术观察ATRA和As2O3对口腔鳞癌药物化学敏感细胞系诱导分化后CK13在癌细胞中的定位和定性改变；Western blot法和RT-PCR法观察ATRA和As2O3对口腔鳞癌药物化学敏感细胞系诱导分化后CK13蛋白和CK13-mRNA的半定量表达。
结果:MTT法显示ATRA和As2O3在三种口腔鳞癌细胞系中KB细胞药物化学敏感最高，同时发现As2O3对三种口腔鳞癌细胞药物化学敏感性均比ATRA高：流式细胞术检测发现ATRA作用于KB细胞96h显示G0/G1期的阻滞，As2O3作用于KB细胞96h未见明显细胞周期百分率的阻滞，ATRA和As2O3 96h抑制率明显升高；免疫荧光显示CK13在不加药组无表达，ATRA和As2O3作用72h后KB细胞胞浆均有明显着色；Western blot法显示ATRA和As2O3对KB细胞诱导分化后24h CK13蛋白无表达，48h CK13蛋白出现弱表达，72h时诱导分化后CK13蛋白出现明显的表达；RT-PCR法显示ATRA和As2O3对人口腔未分化鳞癌细胞系KB细胞诱导分化后CK13-mRNA表达24h明显升高，48h达高峰，72h出现下降的趋势，并且CK13-mRNA的变化表达提前于CK13蛋白的表达。
结论：MTT显示As2O3对口腔鳞癌细胞系药物敏感性比ATRA高；流式细胞术检测显示ATRA和As2O3细胞周期影响不明显；Western blot法和RT-PCR法显示As2O3和ATRA均可使CK13蛋白和CK13-mRNA表达升高，CKl3-mRNA提前与CK13蛋白改变，免疫荧光显示CK13蛋白定位染色于细胞质。由上可知As2O3可做为口腔鳞癌诱导分化治疗中ATRA的替代药物；CK13可作为口腔鳞癌诱导分化的标记物和判断临床口腔鳞癌诱导分化疗效的指标。