异丙酚对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

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【目的】本研究旨在通过建立大鼠部分肝叶缺血再灌注损伤模型,测定肝脏缺血再灌注后血清中炎症因子TNF-α、IL-10的水平、NF—κB活性的变化及观察肝细胞超微结构的变化,并通过应用不同剂量的异丙酚,观察其对上述指标的影响,从而明确肝脏缺血再灌注损伤发生机制及异丙酚的保护作用机制。 【方法】Wistar雄性大鼠72只,体重250~350g,均行腹腔注射3%戊巴比妥钠30mg·kg-1麻醉,将其随机分为四组,每组18只(1)对照组(A组)麻醉后在无菌条件下开腹及暴露左、中肝叶。(2)缺血再灌注组(B组)。(3)缺血再灌注+异丙酚4mg组(C组)。(4)缺血再灌注+异丙酚6mg组(D组)。根据缺血再灌注的不同时间,每组又分成3个亚组(n=6),T1:阻断30min再灌注30min,T2:阻断60min再灌注60min,T3:阻断60min再灌注120min。C、D在缺血再灌注前即刻,经股静脉用电子微量泵分别输注异丙酚4mg·100g-1·h-1、6mg·100g-1·h-1,至各实验时点结束。A、B组以同样方式输注等量林格氏液。于每实验时点用颈椎脱臼法将大鼠处死,立即取静脉血2ml,经离心后取血清采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)水平的变化。同时取大鼠左外叶部分肝组织,采用凝胶电泳迁移率法(EMSA)测定核转录因子-κB(NF-κB)的DNA结合活性。并于T3时点取0.5cm×0.5cm×0.3cm肝组织以投射电镜观察肝细胞超微结构及线粒体、细胞凋亡的改变。 【结果】1.血清中细胞因子水平的变化 与A组比较,B组于T1、T2、T3 3个时点血清TNF-α水平升高(P<0.05),且随肝门阻断时间的延长,逐渐升高(P<0.05)。而血清IL-10水平于T1时点有上升趋势,但于T2时点开始下降;
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