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河南是我国花生主产区之一,种植面积大,单产高,总产占全国25%。作为河南省主要的经济作物,花生生产备受瞩目。花生茎腐病是严重影响花生生产的病害之一,在花生主要种植区均有发生,造成的经济损失可达30%~50%。花生茎腐病在花生生长的各个时期均能发生,尤其在幼苗期最易感染,一旦发病便整株死亡,给花生生产带来很大损失。为了研究花生茎腐病发生的原因,我们分离并研究了花生茎腐病致病菌株及其生长条件;筛选了不同药剂对致病菌株的防治效果;采用牙签接种的方法对33份花生品系抗病性进行了鉴定;并对AP2/ERF基因家族进行了生物信息学分析及AhERF基因在抗、感病品种(系)中的表达。主要研究内容如下:1.在2015~2016年花生生长季节,从河南省6个县(市)采集花生茎腐病发病植株,室内分离纯化得到7个菌株,回接进行致病性测定,其中6个菌株引发花生茎腐病,分离所得菌株与接种菌为同一种病菌。菌株分生孢子呈椭圆形、长圆形或卵圆形,基部平截,端部钝圆,单胞,初无色,双层壁,大小(22.75~30.25)μm×(12.5~15.1)μm;通过对不同菌株ITS序列进行分析,确定分离所得的7个菌株中有6个为花生茎腐病病原菌棉色二孢(Diplodia gossypina),与可可球二孢(B.theobromae)和可可毛色二孢(L.theobromae)为同物异名;另1个菌株为Aspergillus属真菌。2.将分离得到的病原菌菌株(Diplodia gossypina)在不同培养基、pH值条件下培养,观察测量其长势及生长速率;将菌丝在不同温度条件下处理10 min测其致死温度。结果表明,花生茎腐病在MEA培养基上生长较快,花生杆培养基上菌丝生长较为致密。菌丝在pH值3~11时均可生长,当pH≥12时不能生长,生长最适pH值为4~8。在温度高于56°C,处理10 min后菌丝死亡,不能生长。3.采用生长速率法测定了不同药剂对花生茎腐病病原菌(D.gossypina)的抑制作用。结果表明:纳米氧化锌对花生茎腐病病原菌并无明显抑制效果;25%戊唑醇可湿性粉剂处理后病原菌菌落生长最慢,与对照存在显著差异,抑菌率较高,防治效果最好;60%唑醚代森联水分散粒剂次之;70%甲基托布津可湿性粉剂、80%多菌灵进口原药及50%醚菌酯水分散粒剂与对照无显著差异,抑制效果较差。4.采用牙签接种法鉴定了33个花生品种(系)的抗性,以病株率计算每个品种(系)的抗性。结果表明:不同花生品种(系)整体上抗茎腐病较差,33个品种(系)中无高抗品种,多数表现为高感,只有PX.19种(系)表现为抗性,PX.27种(系)表现为中抗。5.AP2/ERF转录因子家族在植物体生物和非生物胁迫相中起着重要作用。本文通过对AP2/ERF转录因子家族进行了生物信息学分析,结果表明,该家族有70个成员,其中AP2亚族有33个基因,ERF亚族有24个基因,DREB亚族有12个基因,RAV亚族仅1个基因。6.通过qPCR的方法测定了抗病品种PX.19和高感品种PX.15在病原菌侵染后AhERF基因的相对表达量,结果表明:两个品种根系中均有AhERF基因的表达,高感品种PX.15在接种后的0 d和2 d AhERF基因的相对表达量显著低于对照,4 d时AhERF基因的相对表达量达到最大值,6 d时又迅速降低;抗性品种PX.19在接种后AhERF基因的相对表达量达到最高,之后迅速下降,6 d时处理与对照中AhERF基因的相对表达量无明显差异。可知AhERF基因在接种病原菌后的PX.19根系中表达量迅速增加,而在PX.15中反应较为迟缓,在第4天才迅速增加。