白介素22转基因小鼠构建及体外诱导表达条件摸索

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白介素22(IL22)是由Th17及其它淋巴细胞亚群分泌的一种细胞因子。它既可促进天然防御的炎性过程,也可促进感染或炎症损伤后组织的修复进程,还可在健康状态下维持组织的免疫稳态,但具体的作用要视免疫微环境而定。而由于IL22在机体内的表达是微量瞬时并严格受控的,所以对其进行检测甚至动态监测以深入研究其表达调控和功能特征变得非常困难。本论文试图通过利用白介素22转基因报告技术解决以上问题,根据已有报道的构建策略选取了三种基于细菌人工染色体的转基因报告策略并进行了前期的摸索,随后在293T中进行了表达验证,以确保各构建策略的可靠性,最后选取了其中较为普遍的一种策略尝试了显微注射以期获取阳性鼠,然而对得到的三只小鼠进行检测后发现一只为过表达,两只不表达,未能得到表达适宜的转基因阳性鼠。本论文亦在体外Th17培养条件下对IL22的表达进行了体外的诱导以探讨和优化IL22的产生条件。另一方面,考虑到IL22的表达调控研究虽然主要基于Th17,但IL22的分泌型细胞亚群是十分广泛的,所以猜测可能存在未被发现的能有效调控IL22的转录因子,本论文即利用双荧光报告系统和人源转录因子库对IL22潜在的转录调控因子进行了搜寻,但未能有所斩获。
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