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目的:基于前期本课题组抗炎活性筛选结果,进一步研究新型查耳酮衍生物MW-9抗炎作用及防治多发性硬化的作用机理,为开发具有自主知识产权新型查耳酮衍生物MW-9候选药物提供科学依据。方法:1.体外研究部分,构建小鼠巨噬细胞株Raw264.7炎症细胞模型和原代巨噬细胞模型,MTT法检测MW-9对炎症细胞细胞毒性作用;采用Griss方法检测MW-9对炎症细胞模型NO产生的影响;Western blot法测定MW-9对NF-kB信号通路磷酸化状态水平。2.体内实验,采用MOG35-55诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型,Knoz评分法评价治疗作用,HE染色法观察小鼠脊髓病理损伤程度;ELISA法检测细胞培养上清中IL-17A、IFN-g和TGF-b产生浓度;基因芯片和q-PCR法检测EAE小鼠脊髓组织中细胞因子和趋化因子mRNA的表达情况。流式细胞术检测淋巴细胞表面标志（CD25、CD44、CD11b、Gr1）及T细胞亚群细胞（Th17、Th1细胞和Treg细胞）比例。3.体外Th17分化实验,采用免疫磁珠阴性选择分选CD4+T细胞细胞。在Th17极化条件下,诱导初始T细胞向Th17细胞分化,流式细胞术检测Th17细胞（IL-17A）表达水平。结果:1.体外实验结果显示,新型查耳酮衍生物MW-9显著抑制NO的产生,其CC50和IC50分别为11.24mg/ml和5.37mg/ml,Western blot法检测发现MW-9药物干预显著抑制NF-kB磷酸化水平。2.与模型组比较,新型查耳酮衍生物MW-9显著降低EAE小鼠的临床评分,改善脊髓病灶的病理损伤和炎症浸润;ELISA法检测结果显示,MW-9药物干预组小鼠淋巴细胞培养上清IFN-g和IL-17A低于模型组,其中IL-17A差异具有显著性意义（P<0.05）;流式细胞术结果显示,MW-9药物干预显著降低CD11b+Gr1+中性粒细胞比例（P<0.05）,显著下调Th17细胞（CD4+IL-17A+）表达水平（P<0.05）,然而对Th1细胞(CD4+IFN-g（10）)和Treg细胞（CD4+Foxp3+）比例无明显的影响（P>0.05）。3.基因芯片结果显示,于模型组相比,MW-9干预组小鼠脊髓组织中的细胞因子以及趋化因子都有明显的下调;荧光定量PCR验证结果显示,于模型组相比,MW-9干预组小鼠脊髓组织的炎症因子和趋化因子的表达低于模型组小鼠,其中转录因子STAT1、STAT4以及趋化因子CCR2差异具有显著性意义（P<0.05）。4.MW-9药物干预显著抑制初始T细胞向炎症性Th17细胞分化,差异有显著性意义（P<0.05）。结论:1.新型查耳酮衍生物MW-9具有显著的抗炎作用,其作用机制可能与抑制NF-kB通路磷酸化有关。2.新型查耳酮衍生物MW-9具有显著抗多发性硬化作用,其作用机制可能与抑制炎症性Th17细胞分化和下调趋化因子的表达有关。