多杀霉素对家蚕生殖功能影响研究

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家蚕(Bombyx mori)是农业生产中重要的绢丝昆虫,漫长的人工驯养使得家蚕对外界环境条件极为敏感。近年来为了提高蚕桑经济效益,改变原有的桑园种植单一模式,建立了许多新型桑园套种模式。除此以外,桑园复合经营模式也逐步成为趋势。然而,桑叶作为家蚕唯一的天然食物,极易受到农药的污染。不管是桑园套种还是桑园复合经营模式,在其它农作物害虫防治过程中农药的合理使用显得尤为重要,使用不当便会使桑叶受到污染进而影响桑蚕养殖。微量农药虽然不足以在短时间内造成家蚕的死亡,但可能会对家蚕生物生长发育过程产生持续的不利影响,表现出一定程度代谢损伤和发育障碍。目前大量研究多集中于农药对家蚕的急性毒性药量,中毒特征以及生长发育和蚕茧质量等方面的研究,对其生殖方面的研究甚少。而生殖功能是否健康又关乎家蚕能否顺利完成世代生活以及是否会持续影响子代的生长发育,因此对生殖方面的研究也显得尤为迫切。多杀霉素又名多杀菌素是一种新型环保杀虫剂。因其高效低毒对环境友好,广泛应用于农作物害虫防治。人们对无公害产品需求的增加,使得绿色环保生物杀虫剂被广泛使用,也迫切需要相关研究评价该类生物杀虫剂对非靶标昆虫的潜在危害影响。在多杀霉素低剂量浓度下(0.005mg/L、0.010mg/L、0.015mg/L),3龄起蚕后添食24h染毒桑叶后,一方面对幼虫存活率、发育时长、眠虫体重、蚕茧经济性状等生长发育过程进行评估;另一方面同研究对家蚕雄性生殖发育的潜在影响,初步阐明多杀霉素造成鳞翅目昆虫生殖障碍的机理。研究结果如下:1.多杀霉素对家蚕生长发育的影响多杀霉素对鳞翅目经济昆虫家蚕的毒性作用极强,即使是微量的多杀霉素,也会造成幼虫的大量死亡。3龄和4龄眠虫体重下降,发育整齐度不一。幼虫的发育时长出现延迟,幼虫的总发育时间延长了0.5-1天,某种程度上可能影响了相关发育过程中保幼激素的代谢调控。另一方面幼虫5龄时期发育时间延长,家蚕进食大量桑叶,储备能量从而间接促进5龄熟蚕体重的增加。2.多杀霉素对家蚕经济性状的影响能够成功进入蛹期的家蚕我们对其全茧量、茧层量、茧层重进行了统计。在0.010mg/L和0.015mg/L浓度下,多杀霉素使家蚕在游走期发育时长延长,雌雄的经济性状均出现一定程度的提高。然而研究发现多杀霉素造成家蚕神经中枢麻痹,结畸形茧,损害蚕茧品质,还可能影响了相关的羽化激素,家蚕无法成功羽化为雄蛾和雌蛾。3.多杀霉素对家蚕生殖功能的影响农药对家蚕生长发育毒性方面的研究较多,但是对于生殖方面的研究甚少,通过对雄性精巢组织解剖染色,发现精巢组织变小,颜色由黄变灰。荧光染色发现有核精子束和无核精子束形态异常,细胞核无法聚集,核集中受阻。qRT-PCR结果表明相关紧密连接基因amot,CAP-GLY,cdc42,maguk和tub-α表达量全部下调。成虫交配实验发现雄性的竞争力降低,产卵量和孵化率均降低。对经0.01mg/L多杀霉素处理桑叶喂养的亲代观察子一代在标准条件喂养下的生长发育和生殖情况,研究发现其产卵量和孵化率降低,而生长发育的其它指标都没有受到影响。研究表明微量的多杀霉素对家蚕具有很强的生殖毒性,通过影响紧密连接相关基因的表达造成精子束异常,出现生殖障碍。本研究对环境友好型高效低毒生物杀虫剂多杀霉素对家蚕生殖毒性影响进行研究,积累了多杀霉素对家蚕生长发育及生殖方面的基础数据,为该类生物杀虫剂的规范使用提供了基本依据。
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