【摘 要】
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为了提高发酵麸皮中总阿魏酸的释放量,并研究其抑菌效果,首先在单因素试验基础上,利用Box-Behnken试验及响应面法分析,分别优化了黑曲霉和好食脉孢菌发酵麸皮产总阿魏酸的培养基配方;再进行了上述两菌混合发酵,并比较了单菌与混菌发酵时总阿魏酸的释放量。然后,用多种溶剂提取未发酵麸皮、单菌发酵麸皮、混菌发酵麸皮中的总阿魏酸,并选用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌株,进行了总阿魏酸提取物抑菌效果的检测
【基金项目】
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山西省优秀人才科技创新项目（201705D211029）； 山西省重点研发计划项目（201903D221013,201603D221027-3）； 晋中市科技攻关项目（N1612）；
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为了提高发酵麸皮中总阿魏酸的释放量,并研究其抑菌效果,首先在单因素试验基础上,利用Box-Behnken试验及响应面法分析,分别优化了黑曲霉和好食脉孢菌发酵麸皮产总阿魏酸的培养基配方;再进行了上述两菌混合发酵,并比较了单菌与混菌发酵时总阿魏酸的释放量。然后,用多种溶剂提取未发酵麸皮、单菌发酵麸皮、混菌发酵麸皮中的总阿魏酸,并选用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌株,进行了总阿魏酸提取物抑菌效果的检测。试验结果表明:（1）黑曲霉发酵麸皮产阿魏酸的优化工艺为:在10 g麸皮中加14 mL水溶液,在所加水溶液中,麦芽糖、尿素、磷酸二氢钾的浓度分别为6.42 g/L、2.00 g/L、0.11 g/L;黑曲霉孢子悬液浓度为1.3×108CFU/mL,接种量为1.0 mL;30℃发酵96 h总阿魏酸释放量达到最高,测得发酵麸皮中总阿魏酸释放量为2.72±0.09 mg/g,是未添加麦芽糖、尿素、磷酸二氢钾麸皮发酵总阿魏酸释放量的2.5倍。（2）好食脉孢菌发酵麸皮产阿魏酸的优化工艺为:在10 g麸皮中加14 mL水溶液,在所加水溶液中,葡萄糖、尿素、氯化镁的浓度分别为7.00 g/L、2.01 g/L、0.11 g/L;好食脉孢菌孢子悬液浓度为1.6×106CFU/mL,接种量为1.0 mL;30℃发酵60 h总阿魏酸释放量达到最高,测得发酵麸皮中总阿魏酸释放量为1.19±0.02 mg/g,是未添加葡萄糖、尿素、氯化镁麸皮发酵总阿魏酸释放量的2.7倍。（3）黑曲霉与好食脉孢菌混菌发酵麸皮产阿魏酸的工艺为:在10 g麸皮中加入14 mL水溶液,在所加水溶液中,麦芽糖、尿素、磷酸二氢钾的浓度分别为6.42 g/L、2.00 g/L、0.11 g/L;先接种黑曲霉,孢子悬液浓度为1.3×108CFU/mL,接种量为0.6 mL,30℃发酵24 h;再接种好食脉孢菌,孢子悬液浓度为1.6×106CFU/mL,接种量为0.4 mL,30℃再发酵72 h总阿魏酸释放量达到最高,测得发酵麸皮中总阿魏酸释放量为3.48±0.05 mg/g,比黑曲霉发酵麸皮优化工艺总阿魏酸释放量提高了28%,比好食脉孢菌发酵麸皮优化工艺总阿魏酸释放量提高了192%。（4）用45℃热水、80%甲醇、乙酸乙酯、乙酸乙酯:乙醇（1:1）、乙酸乙酯:乙醚（1:1）、75%乙醇、80%乙醇、85%乙醇、90%乙醇、95%乙醇溶剂分别提取未发酵麸皮、黑曲霉发酵麸皮、好食脉孢菌发酵麸皮、混菌发酵麸皮等4个样品中的总阿魏酸,结果表明,75%乙醇作为提取溶剂时,上述4个样品总阿魏酸提取量均最大,分别为0.12±0.01 mg/g、2.92±0.07mg/g、1.32±0.22 mg/g、3.92±0.14 mg/g。将上述总阿魏酸提取物调成等浓度（10 mg/L）,再进行抑菌试验,结果表明,未发酵麸皮中总阿魏酸75%乙醇和45℃热水提取物分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果最显著,抑菌圈直径分别为6.92±0.05 mm和6.38±0.11 mm;黑曲霉发酵麸皮中总阿魏酸80%乙醇和75%乙醇提取物分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果最显著,抑菌圈直径分别为9.13±0.10 mm和9.34±0.09mm;好食脉孢菌发酵麸皮中总阿魏酸乙酸乙酯和75%乙醇提取物分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果最显著,抑菌圈直径分别为9.82±0.43 mm和9.07±0.05 mm;混合发酵麸皮中总阿魏酸75%乙醇提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果均最显著,抑菌圈直径为11.25±0.10 mm和11.54±0.29 mm。综上所述,黑曲霉与好食脉孢菌混菌发酵麸皮总阿魏酸释放量显著高于单菌（P<0.05）,等浓度情况下,混菌发酵产总阿魏酸75%乙醇提取物抑菌效果显著高于单菌的（P<0.05）。本研究为把麸皮发酵释放阿魏酸及其衍生物研发为新型抗菌药物,以及把麸皮研制成替抗功能饲料提供了数据参考。
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