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血吸虫病广泛流行于亚洲、非洲和南美洲的多个国家和地区,是最严重的寄生虫病之一。我国是日本血吸虫病流行区,目前多个地区已达到传播阻断标准,但随着全球一体化进程的加快,我国外来输入性血吸虫病病例呈现上升趋势,如不加以重视,很有可能造成输入性血吸虫病在我国境内的爆发。曼氏血吸虫病(Schistosomiasis mansoni)主要流行于非洲、中东、美洲的热带和亚热带等多个地区,是一种严重危害疫区人民健康,阻碍社会经济发展的人兽共患病。双脐螺中的很多螺种可以自然感染一种或多种曼氏血吸虫株,但其易感性各有不同。其中藁杆双脐螺(Biomphalaria straminea)作为曼氏血吸虫的中间宿主之一,在很多曼氏血吸虫病流行区是十分重要的传播环节。藁杆双脐螺是专一性淡水水生螺,主要分布在非洲、美洲的多个地区。但也有扩散到域外的案例,20世纪七十年代中国香港地区首次发现了藁杆双脐螺的踪迹以来,现在已经扩散到了广州和深圳的多个水域。鉴于其作为传播曼氏血吸虫病的中间宿主,加上我国现在流动人口增多,尤其大量人员往返于曼氏血吸虫病流行区,可能会携带病源进入藁杆双脐螺孳生地,具有潜在曼氏血吸虫病暴发流行的风险。故本文就藁杆双脐螺的生态学特性及其在中国南方地区的扩散进行了研究,对疾病传播风险做出预测,研究了藁杆双脐螺对于氯硝柳胺的敏感性,为藁杆双脐螺的防治提供了思路和技术储备。目的:1.研究藁杆双脐螺孵化规律,比较藁杆双脐螺自体生殖和异体生殖的差异,观察成螺产卵受光照因素的影响的差异,以及成螺在缺食缺水环境下的存活力,旨在为现场预防和控制提供科学的参考。2.预测藁杆双脐螺由现孳生地向沿海省份及内陆其他省份扩散的趋势及风险。3.研究氯硝柳胺对藁杆双脐螺的杀灭效果,为防制藁杆双脐螺提供科学指导和技术储备。方法:1.在25℃条件下观察并记录藁杆双脐螺螺卵孵化过程,了解其孵化周期和规律,以及研究由幼螺成长到成螺的发育时间。在实验室条件下,采用单枚螺卵单独孵化、单独饲养的方法,培养出自体受精的藁杆双脐螺;采用多个卵块集体孵化、集中饲养的方式,培养出异体生殖的藁杆双脐螺。比较两者之间产卵情况随时间变化的差异、螺卵孵化情况的差异。将藁杆双脐螺成螺分别饲养于24h持续光照、24小时避光、日间光照12h、夜间光照12h四个不同的条件下(25℃),观察并记录一周内产卵块数与产卵数,探索光照因素对其产卵的影响。将30只藁杆双脐螺成螺分别置于不同温度下恒温培养箱,观察并记录15天产卵量,探究成螺可产卵的温度区间。将藁杆双脐螺成螺置于干燥海绵上,25℃条件下,记录其随时间变化的生存率。2.采用生物学方法在实验室条件下测定藁杆双脐螺螺卵、幼螺和成螺能够生存的极值温度和平均世代发育有效积温,采集海南、广东、广西、福建、浙江、上海、江苏、安徽、湖北、湖南、江西、重庆、贵州、云南、四川共15省2010-2016年380个气象监测点气象数据,建立数据库,采用GIS软件分析出藁杆双脐螺可能扩散的地区。3.将25%氯硝柳胺悬浮剂配制成有效浓度为0.125 mg/L、0.063 mg/L、0.032mg/L、0.016 mg/L、0.008 mg/L的溶液,将藁杆双脐螺成螺和幼螺分别置于相应浓度药液中24h、48h、72h后,脱氯水清洗3次,复苏24小时后,采用清水复苏法鉴别其死活。按照线性加权回归法计算出LC50和LC95。配制25%氯硝柳胺悬浮剂有效浓度分别为0.030 mg/L、0.025 mg/L、0.020 mg/L、0.015 mg/L、0.010 mg/L、0.005mg/L,将新产藁杆双脐螺螺卵浸入药液(设置对照组,对照组药液为脱氯水),置于25℃培养箱24、48、72h后脱氯水冲洗3次,继续置于25℃培养箱孵化,显微镜下观察并记录其孵化数,总数减去孵化数即为死亡数,按照线性加权回归法计算出LC50和LC95。结果:1.藁杆双脐螺由螺卵孵化为幼螺需要9天时间,由螺卵发育至产卵的成螺,平均发育历期为129.27±14.21天。藁杆双脐螺自体、异体受精相比较,异体生殖条件下螺产生的卵块数、卵总数的高峰值为13.03±3.91块、268.07±71.36个,均比自体生殖高峰值(9.13±3.10块、170.83±53.48个)要大,且产卵高峰持续时间也是异体生殖显著高于自体生殖,在螺卵的孵化率方面,异体生殖组螺卵孵化率为69.40%,与自体生殖组螺卵孵化率的62.16%相比,统计学分析显示P>0.05,无统计学意义,即两组孵化率没有差异。藁杆双脐螺在光照条件下的产卵量大于避光条件下的产卵量,24h光照组、24h避光组与12h光照组相比较,统计学分析结果显示p<0.01,有统计学意义,即各组之间具有显著差异,证明光照对藁杆双脐螺产卵具有促进作用。藁杆双脐螺成螺产卵的温度范围为9.64-32.21℃。藁杆双脐螺在实验室缺食缺水环境下,最多可存活67天,两个月之内依然有15%的螺可以复苏进行生命活动。2.藁杆双脐螺螺卵生存的半数致死低温和致死低温分别为5.33℃和4.23℃,半数致死高温和致死高温分别为36.31℃和38.04℃;幼螺生存的半数致死低温和致死低温分别为5.44℃和3.45℃,半数致死高温和致死高温分别为31.69℃和33.52℃;成螺生存的半数致死低温和致死低温分别为4.01℃和2.96℃,半数致死高温和致死高温分别为32.47℃和33.32℃。平均世代发育有效积温为2684.94±295.14(日·度)。结合其半数致死低温、高温数据和2016年1月份和7月份日平均气温,采用逆距离加权插值法对研究区数据进行插值,结合arcGIS软件进行地图显示,预测分析出藁杆双脐螺在海南省、广西省、广东省、福建省及云南的部分地区生存风险较高,很有可能由现在在广州、深圳的孳生地向以上地区扩散,湖南省、江西省、浙江省及贵州省的部分地区藁杆双脐螺的扩散风险为中,其他地区扩散风险较低。根据实验室条件下得出的藁杆双脐螺平均世代发育有效积温和2010-2016年月平均气温估测藁杆双脐螺扩散后的世代发生数,分析显示,在海南省、广西省、广东省以及福建省和云南省的小部分地区螺世代数在2代及以上,即有繁殖后代定殖的风险。3.藁杆双脐螺对氯硝柳胺的敏感性较高,25%氯硝柳胺悬浮剂对藁杆双脐螺成螺浸杀24h、48h、72h的半数致死剂量分别为0.013 mg/L、0.014 mg/L、0.010 mg/L,对幼螺浸杀24h、48h、72h的半数致死剂量分别为0.014 mg/L、0.013 mg/L、0.013mg/L,对螺卵浸杀24h、48h、72h的半数致死剂量分别为0.013 mg/L、0.013 mg/L、0.011 mg/L。结论:1.藁杆双脐螺孵化时间较短,成螺可以通过自体受精和异体受精繁殖后代,两者的繁殖力随时间变化存在显著差异,异体生殖的螺繁殖力总体上稍优于自体生殖的螺。螺卵、幼螺及成螺的单独存在在适宜的环境条件下有可能通过自体生殖的方式繁育出螺种群。光照因素可促进藁杆双脐螺产卵量的增加。在25℃温度条件下,藁杆双脐螺成螺离开水体不进食可以存活67天,提示藁杆双脐螺并不会因为干旱、缺食而在短期内死亡,应对干旱、缺食等恶劣环境条件的能力很强,易于扩散、定殖,对血吸虫病的传播存在潜在风险。2.藁杆双脐螺已经入侵定殖于我国香港、广州等地,其有进一步向广东省其他地区、海南省、广西省、云南省和福建省的部分地区扩散的风险,风险程度由南向北呈现减弱趋势。3.藁杆双脐螺对氯硝柳胺敏感性较高,25%氯硝柳胺悬浮剂对成螺、幼螺和螺卵(72h半数致死剂量分别为0.013mg/L,0.013mg/L,0.011mg/L)均有较好的杀灭效果。在其有效的半数致死剂量下,尚未达到对水中软体动物、鱼类、水生甲壳类、水生植物造成影响的毒性剂量[1]。可作为控制藁杆双脐螺的储备杀螺药物。