【摘 要】
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【目的】本课题旨在研究丹参酮ⅡA增强NK细胞抗非小细胞肺癌效应的作用及其分子免疫机制。【方法】MTT细胞活性检测丹参酮ⅡA直接抑瘤效应;CCK细胞活性检测丹参酮ⅡA对NK细胞的影响;CD107α流式检测丹参酮ⅡA对增强NK细胞对A549、H460和H1299细胞的脱颗粒效应;CFSE/7AAD双染流式检测丹参酮ⅡA对NK细胞杀伤A549、H1299及H460细胞的影响;化学发光法检测丹参酮ⅡA对N
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【目的】本课题旨在研究丹参酮ⅡA增强NK细胞抗非小细胞肺癌效应的作用及其分子免疫机制。【方法】MTT细胞活性检测丹参酮ⅡA直接抑瘤效应;CCK细胞活性检测丹参酮ⅡA对NK细胞的影响;CD107α流式检测丹参酮ⅡA对增强NK细胞对A549、H460和H1299细胞的脱颗粒效应;CFSE/7AAD双染流式检测丹参酮ⅡA对NK细胞杀伤A549、H1299及H460细胞的影响;化学发光法检测丹参酮ⅡA对NK细胞杀伤A549-luciferase细胞的影响;LLC皮下荷瘤小鼠检测丹参酮ⅡA直接抑瘤效应;H460皮下荷瘤模型检测丹参酮ⅡA与NK细胞联合抑瘤效应;LLC皮下荷瘤小鼠检测丹参酮ⅡA在加入NK细胞阻断抗体PK136的抑瘤效应;流式检测丹参酮ⅡA对A549、H460及H1299细胞表面相关配体的影响;使用TRAIL及NKG2D阻断剂后检测丹参酮ⅡA对NK细胞杀伤A549、H460细胞的影响;Real Time PCR及Western Blot检测丹参酮ⅡA对PERK/ATF4/CHOP信号通路的影响。【结果】1.丹参酮ⅡA可以直接抑制非小细胞肺癌A549、H1299及H460细胞的生长;2.丹参酮ⅡA对NK细胞生长的影响并不显著;3.丹参酮ⅡA可以增强NK细胞对A549、H460细胞的脱颗粒效应,对H1299细胞并无显著改变;4.丹参酮ⅡA可以增强NK细胞对A549、H460及H1299细胞的杀伤效应;5.丹参酮ⅡA可以增强NK细胞对A549-luciferase细胞的杀伤功能;6.丹参酮ⅡA直接抑制LLC皮下荷瘤小鼠瘤块的生长;7.丹参酮ⅡA可以联合NK细胞抑制H460荷瘤小鼠的瘤块生长;8.在清除NK细胞后,丹参酮ⅡA对LLC皮下荷瘤小鼠瘤块的抑制作用被削弱;9.丹参酮ⅡA上调A549、H460及H1299细胞表面DR5及ULBP1表达;10.丹参酮ⅡA在TRAIL及NKG2D阻断剂的影响下,其提升NK细胞活性功能受抑制。11.丹参酮ⅡA能够激活PERK/ATF4/CHOP信号通路。【结论】1.丹参酮ⅡA可以增强NK细胞对非小细胞肺癌A549、H1299、H460细胞的杀伤;2.在体内丹参酮ⅡA同样可以增强NK细胞对肿瘤的杀伤效应,并且在清除NK细胞后抑瘤作用受到抑制;3.丹参酮ⅡA上调非小细胞肺癌细胞表面DR5及ULBP1表达;4.在使用TRAIL、NKG2D抑制剂阻断后丹参酮ⅡA增强NK细胞活性的能力受到抑制;5.ULBP1和DR5上调可能与丹参酮ⅡA激活PERK/ATF4/CHOP信号通路相关。
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