黄花草木樨化感抑草作用及其化感物质的分离鉴定

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植物化感作用是农业生态系统中一个非常重要的自然现象,化感植物被广泛认为是一种新型生物除草剂,在杂草生物防除方面发挥重要作用,化感作用的研究近年来备受关注。本研究以黄花草木樨(Melilotus officinalis Desr.)为研究对象,采用实验室生物检测测定了黄花草木樨水浸提液处理对7种杂草,包括灰灰菜(Chenopodium album Linn.)、臭草(Melica scabrosa Trin.)、千穗谷(Amaranthus hypochondriacus)、稗草(Echinochloa crusgalli L. Beauv.)、篇蓄(Polygonumaviculare L.)、山苦荬(Thlaspi arvense Linn.)、车前草(Plantago asiatica L.),4种牧草多花黑麦草(Lolium multiflorum)、黄花草木樨、红三叶(Trifolium pratense)、紫花苜蓿(Medicago sativa L. cv.Vitoria)种子萌发和幼苗生长的影响;通过春秋两季在田间施用不同量的黄花草木樨干草粉测定其对田间杂草生物量的影响,并与不同浓度的6种常用化学除草剂(百草枯、盖草能、草甘膦、乙草胺、二甲戊灵、精异丙苯草胺)进行了抑草效果的比较;通过色谱分离和生物活性检测相结合的方法,采用气质联用和核磁共振相结合的分析技术,对黄花草木樨水浸提液中的化感活性物质进行了分离和鉴定,并通过生物活性检测验证了其化感抑草活性,明确了黄花草木樨中发挥化感效应的主效化感物质。试验结果如下:1.黄花草木樨水浸提液处理能显著抑制千谷穗、山苦荬、灰灰菜、稗草、车前草及臭草等杂草的种子萌发(p<0.05),对种子萌发的抑制率为30.30-88.11%;显著抑制多数供试杂草的幼苗生长,其中,水浸提液处理的灰灰菜、臭草、千穗谷、稗草、山苦荬和车前草的幼苗茎长和灰灰菜、臭草、稗草、山苦荬以及车前草的幼苗根长均显著低于对照(p<0.05);显著抑制红三叶、紫花苜蓿、黄花草木樨和多花黑麦草的种子萌发(p<0.05),抑制率为27.56~91.36%,对红三叶、黄花草木樨和多花黑麦草3种牧草的幼苗根长、茎长和苗干重均表现出显著的抑制作用(p<0.05)。2.田间施用黄花草木樨干草粉能显著减少单位面积杂草生物量(p<0.05),且随着黄花草木樨干草粉施用量的增加,单位面积田间杂草数量显著下降(p<0.05),其中,施用量在≥90g/m2时单位面积的杂草数量显著低于对照及30g/m2处理组(p<0.05),其抑草效果与乙草胺、二甲戊灵、盖草等供试化学除草剂相当;在处理后的前20d,其抑草效果显著高于二甲戊灵等化学除草剂(p<0.05);但黄花草木樨干草粉的抑草作用持续时间较短,只有30d左右;处理后30d后,杂草数量会迅速上升,而化学除草剂处理的抑草作用持续较长,在整个试验期,不同浓度化学除草剂的多个处理组的杂草数量保持稳定,且显著低于对照(p<0.05)。3.黄花草木樨水浸提液石油醚相萃取物的化感抑制活性最高,其次是乙酸乙酯相;石油醚相经过柱层析分离得到活性较高的一种物质,GC-MS及NMR鉴定为香豆素;它同时存在于乙酸乙酯相,且是乙酸乙酯相中相对含量最高的物质;生物检测验证结果表明,香豆素具有很强的化感抑草潜力,其浓度为20mg/L时,就能显著抑制多花黑麦草的根长和茎长(p<0.05),40mg/L时,能显著抑制多花黑麦草种子萌发和幼苗生长(p<0.05),80mg/L时,对多花黑麦草种子萌发抑制率为100%,100mg/L时,完全抑制多花黑麦草生长发育将乙酸乙酯相进一步分离得到三层物质,这三层物质处理对多花黑麦草的抑制作用均显著低于乙酸乙酯相(p<0.05),上层处理对多花黑麦草的抑制作用显著高于中层和下层(p<0.05),且上层中相对含量最高的物质仍然是香豆素。黄花草木樨水浸提液处理对篇蓄的种子萌发和幼苗生长有明显的促进作用,对其他供试的6种杂草和4种牧草种子的发芽和幼苗生长均显示出明显的抑制作用,对不同种植物的作用方式和作用强度存在差异,具有一定的选择性;黄花草木樨干草粉在施用量为90g/m2及以上时能显著抑制田间杂草的数量,但其抑草作用持续时间较短,只有30d左右;香豆素为黄花草木樨的主效化感物质,其水溶液在处理浓度≥80mg几能显著抑制多花黑麦草、红三叶、萹蓄、稗草等种子萌发和幼苗生长。
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