太赫兹波对大鼠海马原代神经元的影响研究

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目的:  本研究以大鼠海马原代神经元为研究对象,从神经元的形态结构、功能特征和表观特征等方面探讨太赫兹波辐射的生物效应,将为研究太赫兹波与生物分子间未知的相互作用及其作用机制提供新靶标和思路,并为太赫兹波辐射的生物安全性研究奠定基础。  方法:  采用12 h内新生Wistar乳鼠,取出全脑,分离海马,接种培养。将神经元培养至7d后,分为假辐射组和太赫兹波辐射组。太赫兹波的功率分别为10、30和50 mW,辐射时间分别为10 min、20 min和30 min,单次辐射,于辐射后即刻和1h,采用透射电镜观察神经元超微结构、CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率、HPLC法检测神经元中氨基酸类神经递质含量变化、免疫荧光法检测PSD-95蛋白表达。  结果:  (1)太赫兹波辐射后大鼠海马原代神经元细胞活力发生改变:不同参数的太赫兹波暴露神经元可产生不同的效应;  (2)太赫兹波辐射后海马原代神经元超微结构发生变化:10mW辐射组主要表现出胞核染色质均匀,线粒体肿胀、嵴断裂、空化,内质网肿胀,胞浆中溶酶体明显增多;50mW辐射组线粒体损伤加重;  (3)太赫兹波辐射后海马原代神经元细胞凋亡率发生改变:10mW太赫兹波辐射可增加细胞凋亡率;  (4)太赫兹波辐射后海马原代神经元氨基酸类神经递质含量发生改变:与假辐射组相比,10、30、50 mW辐射30 min组,Arg、Ile、Leu、Lys、Pro、Thr含量于辐射后即刻均明显降低;10和30 mW辐射30 min组,Glu和Gly含量于辐射后即刻均明显增加;10和50 mW辐射30 min组,Ser含量于辐射后即刻明显降低;10 mW辐射30 min组,Phe含量于辐射后即刻明显降低;30 mW辐射30 min组,Ala、Met、Tyr和Val于辐射后即刻均明显增加;  (5)太赫兹波辐射后海马原代神经元PSD95呈强绿色荧光,假辐射组与太赫兹波辐射组相比表达未见明显变化。  结论:  (1)不同频率及输出功率(0.12 THz/10 mW,0.141 THz/30 mW和0.157 THz/50 mW)的太赫兹波源、不同辐射时间(10 min和30 min)、不同收集样品时间点(辐射后即刻和1 h)的组合模式辐射海马原代神经元,能够影响神经元活力。  (2)30 mW太赫兹波辐射神经元30 min提升神经元活性,不影响神经元结构和凋亡,并能够提高神经递质释放以增加突触可塑性。
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