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目的通过建立非高血糖的急性肺损伤（ALI）动物模型，观察胰岛素对肺泡液体清除（AFC）和上皮钠离子通道（ENaC）表达的调控，探讨胰岛素在ALI中的作用；同时通过体外培养肺泡上皮细胞A549，进一步明确在胰岛素作用下调控ENaC可能的信号通路及作用机制，为其今后的临床应用提供理论依据及新思路。方法（1）成年健康的SD大鼠经腹腔注射戊巴比妥（50mg/kg）麻醉后，行颈静脉置管。①胰岛素组（LPS+Insulin）：通过颈静脉给予脂多糖（LPS）（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入胰岛素（0.1U/kg/h）；②渥曼青霉素（PI3K阻断剂）组（LPS+Insulin+Wortmannin）：通过颈静脉给予LPS（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入胰岛素（0.1U/kg/h），同时在给予LPS前90min，LPS后90min和360min分别静脉给予渥曼青霉素（0.06mg/kg）。③脂多糖（LPS）组：通过颈静脉给予LPS（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入等量生理盐水；④对照组（Control）：通过颈静脉给予等量生理盐水，并在颈静脉注射前16h微量泵入等量生理盐水。各组大鼠分别于颈静脉注射后0、1h、4h、8h抽取静脉血通过血糖仪和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血糖和胰岛素含量变化。各组SD大鼠抽取静脉血后处死，并收集完整肺组织。右肺行AFC和肺泡灌洗液（BALF）检测，左肺行总肺水含量（TLW）分析。采用HE染色观察肺组织病理学改变，进行肺损伤评分比较。免疫组织化学检测肺组织ENaC表达变化情况。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肺组织ENaCmRNA及蛋白表达情况，Akt磷酸化水平和Nedd4-2蛋白表达情况（。2）体外培养A549细胞，分为①对照组（Control）：加入无血清培养基培养；②胰岛素组（Insulin）：用含胰岛素（200mU/L）的培养基培养；③LY294002（PI3K阻断剂）组（Insulin+LY294002）：加入含LY294002(10μM)的培养基培养30min，然后再加入相同作用浓度的胰岛素；④Akt抑制剂组（Insulin+Akt inhibitor）：加入含Akt抑制剂(100nM)的培养基培养30min，然后再加入相同作用浓度的胰岛素，各组均在加入胰岛素后作用2h。RT-PCR和Western blot测定细胞ENaCmRNA及蛋白表达情况，Akt磷酸化水平和Nedd4-2蛋白表达情况，并进一步采用免疫共沉淀法检测Nedd4-2蛋白与ENaC各亚基的变化关系。结果（1）通过0、1h、4h、8h检测血糖和胰岛素含量发现各组血糖和胰岛素变化无显著差异。LPS组BALF中白介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子-α（TNF-α），髓过氧化物酶（MPO）活性及蛋白含量与对照组比较显著增加。胰岛素作用后BALF中IL-6，TNF-α， MPO活性及蛋白含量显著减少，但胰岛素引起的变化效应又被渥曼青霉素所阻断。同时胰岛素治疗后显著改善了LPS诱导的肺损伤病理变化，肺损伤病理评分显著低于LPS组，但渥曼青霉素阻断了胰岛素作用的效应变化。与对照组比较，LPS组AFC显著降低，TLW显著增加。胰岛素作用后AFC显著增加，TLW显著降低，而渥曼青霉素阻断了胰岛素的效应。与LPS组比较，给予胰岛素显著上调了α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的mRNA和蛋白表达及Akt磷酸化水平，Nedd4-2蛋白表达下降。渥曼青霉素干预后，α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的mRNA和蛋白表达及Akt磷酸化水平下降，Nedd4-2蛋白表达增加。（2）胰岛素作用细胞后明显上调了α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的mRNA和蛋白表达，同时Akt磷酸化水平增加，Nedd4-2蛋白表达下降。分别给予LY294002和Akt抑制剂干预后，α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC的mRNA和蛋白表达下降，Akt磷酸化水平下降，Nedd4-2蛋白表达增加。进一步通过免疫共沉淀检测提示胰岛素作用后与α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC结合的Nedd4-2表达减少。分别给予LY294002和Akt抑制剂干预后，与α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC结合的Nedd4-2表达增加。结论（1）胰岛素可以促进肺泡水肿液的清除，从而减轻ALI肺泡水肿液的聚集，降低肺水含量。（2）胰岛素通过PI3K/Akt信号通路调控ENaC的表达，从而影响肺水肿液的清除。（3）胰岛素通过PI3K/Akt信号通路，抑制了Nedd4-2与ENaC各亚基的结合，从而活化了ENaC，使ENaC各亚基表达增加。