论文部分内容阅读
目的探讨乙型病毒性肝炎患者血浆中四种非编码RNA(miR-122、miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19)的动态表达及其与炎症、细胞周期因子的关系,分析这四种非编码RNA在乙型病毒性肝炎中的意义。方法研究对象:分为健康对照组101人、乙型肝炎组86人(按时点不同分为0w、1w、2w、3w、4w组)。现场调查:查阅病历获取研究对象的性别、年龄、烟酒嗜好等一般情况,肝功能检查等情况;将研究对象血液标本收集并于-80℃储存备用。实验室检测:实时荧光定量PCR方法检测各组血浆中miR-122、miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19的表达量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测炎症因子(IL-6、TNF-α)和细胞周期因子(p53、Cyclin D1)蛋白含量。统计分析方法:计量资料用均数±标准误(x±SE)表示;各指标不同时间点的动态分析采用重复测量方差分析;各指标在健康对照组与乙型肝炎组的组间分析采用单因素方差分析;相关性分析采用Pearson相关分析。结果首先,进行一般因素分析:性别、年龄、文化程度、吸烟、饮酒在乙型病毒性肝炎患者和健康对照组间的差异无统计学意义,说明在两组间各指标表达差异可能与以上因素无关,具有均衡可比性。其次,通过对乙型肝炎患者各时点指标进行重复测量方差分析,可见miR-122、miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19这四种非编码RNA在乙型病毒性肝炎患者血浆均呈高表达(均P<0.05);随临床治疗后病情缓解miR-122呈先升高后下降趋势,miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19表达下降。通过将这四种非编码RNA的的动态表达与ALT、AST水平进行相关性分析,发现其相互存在正相关(P<0.01),故可说明四种非编码RNA与乙型病毒性肝炎所致的肝损伤关系密切。第三,通过分析四种非编码RNA与炎症因子IL-6、TNF-α的关系,发现四种非编码RNA的变化伴随IL-6、TNF-α的改变,表现为正相关(P<0.01),尤其是miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19三者与其相关性更佳。第四,将这四种非编码RNA与细胞周期相关因子p53、Cyclin D1的关系进行分析,试图找到这四种非编码RNA在乙型病毒性肝炎中的作用方式,发现这四种非编码RNA分别与Cyclin D1呈正相关;miR-155、lnc RNA H19与p53呈负相关(P<0.01)。说明这四种非编码RNA与细胞周期的关系密切,且相互作用方式不同。最后,分别将miRNA与lnc RNA进行相关性分析,结果发现miR-155与两种lnc RNA关系较miR-122更为密切。结论四种相关非编码RNA(miR-122、miR-155、lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19)在乙型病毒性肝炎患者血浆中存在异常表达,与乙型病毒性肝炎所致的肝损伤相关,并且参与乙型病毒性肝炎的炎症反应及细胞周期调控,为乙型病毒性肝炎的肝损伤监测及诊疗提供了新视角;miR-155与lnc RNA MALAT1、lnc RNA H19可能共同参与乙型病毒性肝炎的发生、发展过程。