金粉蕨素对大鼠颈动脉损伤后狭窄的早期预防作用的研究

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目的:建立血管内膜球囊损伤模型,通过观察金粉蕨素对球囊损伤后颈总动脉内膜增生情况的影响,探讨金粉蕨素对球囊损伤后血管内膜增生的早期预防作用及其机制。方法:将64只大鼠雄性SD大鼠,300-400g,采用随机化原则分为4组:假手术组、手术组、金粉蕨素低剂量组和金粉蕨素高剂量组,每组16只。假手术组、手术组实验期间采用等体积生理盐水灌胃,金粉蕨素低剂量组和高剂量组术前一周开始,每天分别予以20mg/kg、80 mg/kg的金粉蕨素进行灌胃干预。构建左颈总动脉球囊损伤模型,各组分别于术后7天、14天取左颈总动脉标本。HE染色在光学显微镜下观察血管内膜增生情况;免疫组织化学染色检测血管组织中pERK1/2的表达,利用计算机图像分析软件对各组内膜增生的情况进行分析:测量各组血管内膜的厚度病统计分析;行蛋白质印迹法(免疫印迹试验)检查标本血管组织中pERK1/2蛋白的表达。结果:1、组织切片HE染色光镜下观察血管内膜增生情况,结果显示:术后7天、14天假手术组颈动脉内膜均光滑,完整性较好,无新生内膜形成;与假手术组相比,手术组和金粉蕨素组血管内膜有不同程度的增厚,管腔明显变狭窄,并且有新生内膜形成;而与手术组比较,金粉蕨素组血管内膜增殖及管壁增厚,但管腔缩小明显轻于手术组,而高剂量金粉蕨素组的血管壁厚度明显小于低剂量金粉蕨素的血管壁厚度;2、免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹试验检测血管组织中pERK1/2的表达,两种方法检测结果均显示:与假手术组比较,手术组pERK1/2表达明显增高(p<0.05),说明球囊损伤血管后能够活化ERK1/2通路,使其蛋白表达明显升高;而与手术组比较,金粉蕨素组pERK1/2表达明显低于手术组(p<0.05),并且高剂量组的pERK1/2表达明显低于低剂量组(p<0.05);结论:1、金粉蕨素可以有效地抑制大鼠颈动脉球囊损伤血管后内膜的早期增厚,并且与剂量相关;2、金粉蕨素预防血管内膜早期增厚的作用机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。
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