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黄瓜花叶病毒（CMV）是危害最为严重的植物病原之一，越来越多地被作为模式病毒用于植物与病毒的互作研究。由于抗性基因的缺乏，使得该病毒的防治工作收效甚微。至今，抗CMV病毒研究工作主要集中在转基因表达病毒来源的蛋白或基因部分序列，或者表达CMV的卫星RNA。因此，寻找更为有效地抗病毒的方法和策略是防治植物病毒病的主要任务之一。本论文利用最近报道的靶序列模拟技术(Target Mimicry, TM)，以CMV作为研究对象，探索该技术在抗植物病毒中的可行性。模拟靶序列是一种能被miRNA识别并互作的目标序列，但不被miRNA切割。通过设计miRNA的模拟靶序列，并将其整合入病毒基因组，利用植物编码的miRNA与模拟靶序列的结合，分析二者的结合对CMV的复制、翻译和积累水平以及致病性的影响，明确靶序列模拟技术在CMV防治研究中的可行性。首先，我们将miR159、miR162和miR170的模拟靶序列承载于含有报告基因GFP的CMV-GFP RNA3上，通过浸润接种侵染本氏烟。荧光观察结果与Western印迹结果显示：实验组的报告基因GFP荧光表达量均显著弱于对照组。可见，内源miRNA与其模拟靶序列结合抑制了病毒的积累。进而，我们从病毒的负链合成及翻译水平两个方面分析靶序列模拟技术抑制病毒积累的作用层面。我们将miR162、miR164和miR170的模拟靶序列承载于非完整的CMV-GFP RNA3上，荧光观察结果显示：实验组的荧光量均明显弱于对照组，说明内源miRNA与其模拟靶序列结合显著抑制了蛋白的翻译。我们提取样品叶组织总RNA，反转录出GFP的负链cDNA，经PCR后的结果显示：实验组的GFP负链含量均有不同程度的低于对照组，这说明miRNA与其模拟靶序列结合在一定程度上抑制了CMV负链的形成。最后，我们将模拟靶序列插入野生型CMV的各个基因组RNA上，通过Northern杂交检测病毒各个基因组的积累量，结果显示：模拟靶序列对完整病毒的积累具有不同程度的抑制作用。综上所述，通过本论文的实验研究，我们初步确定靶序列模拟承载于CMV之上，通过减弱病毒基因组负链的合成和病毒蛋白的翻译，在一定程度上抑制病毒的积累。将此技术延伸于转基因植物，有望建立一套抗病毒的新方法。