【摘 要】
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子宫内膜炎是奶牛一种常见的产科疾病,引起奶牛不孕,给奶牛养殖带来严重经济损失。奶牛产后几天内产道保持开放,外界细菌进入子宫腔,有发生子宫内膜炎的危险。而大肠杆菌和葡
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子宫内膜炎是奶牛一种常见的产科疾病,引起奶牛不孕,给奶牛养殖带来严重经济损失。奶牛产后几天内产道保持开放,外界细菌进入子宫腔,有发生子宫内膜炎的危险。而大肠杆菌和葡萄球菌是临床上分离出的主要致病菌。致病菌进入了宫腔后,是否感染取决于细菌毒力及奶牛子宫局部和全身的免疫情况。而子宫局部免疫,特别是局部天然免疫发挥主要的抗感染作用,Toll样受体及相关细胞因子在机体局部天然免疫中起着重要作用。本试验选用6头产后10天的健康奶牛作为实验动物,手术方法向子宫角注入金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌液,在注菌0、3、6、12、24、36、48、72和96h测量奶牛的体温、心率和呼吸频率；采集外周血测定血常规；采集子宫分泌物作细胞学检查；于注菌96h采集子宫组织制作病理切片,观察组织学变化,并利用扫描电镜观察子宫组织的超微结构；ELISA检测外周血血浆IL-1β、IL-6、IL-8、SAA和TNF-α蛋白表达；OT-PCR检测外周血白细胞及子宫分泌物中TLR2、TLR4、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA基因的表达,结果如下：1.注菌前后呼吸频率无明显变化,体温、心率有上升趋势,但与注菌前比较差异不显著；外周血中性粒细胞变化较明显,6h、12h中性粒细胞数目显著高于注菌前(P<0.05)；子宫分泌物细胞学检查发现,注菌后中性粒细胞比例维持较长时间的增高,且与注菌前比较差异极显著(P<0.01)。2.注菌后,子宫内膜上皮变性、坏死、脱落,并有大量中性粒细胞浸润；扫描电镜观察,注菌后子宫内膜失去了原有的结构,受损严重,基本看不到完整的上皮细胞,未观察到完整的纤毛和微绒毛结构。3.注菌前后,外周血血浆TNF-α蛋白浓度未发生显著变化,而IL-1β、IL-6、IL-8和SAA蛋白浓度发生不同程度的升高,且差异显著(P<0.05)；注菌后外周血白细胞和分泌物中TLR2、TLR4mRNA表达均显著升高,相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α mRNA表达也随之升高,且差异显著(P<0.05)。综上所述,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合感染奶牛子宫对奶牛血液理化指标和分泌物细胞学指标有一定影响,并引起子宫内膜组织形态的病理学变化；注菌后迅速激活局部天然免疫反应,其特征是中性粒细胞浸润到子宫内膜和上调对TLR2、TLR4和相关细胞因子的基因和蛋白表达。
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