内源性一氧化碳参与中枢性呼吸调控的离体实验研究

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本文旨在探讨内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)是否参与呼吸活动的中枢性调控。实验采用新生Sprague-Dawley大鼠,制备离体延髓脑片标本,采用电生理学技术,探讨内源性CO在中枢性呼吸调控中的作用。 以舌下神经根节律性自发放电为节律性呼吸活动的指标,分别用血红素氧合酶(beme oxygenase,HO)抑制剂ZnPP-9、CO和HO底物高铁血红素(hemin)灌流延髓脑片,观察舌下神经根呼吸样传出放电活动的变化。 实验分为5个组(n=8/组):单纯人工脑脊液(artificial cerebrospinalfluid,ACSF)对照组、ZnPP-9组、外源性CO组、Hemin组和ZnPP-9+IIemin组,观察舌下神经根节律性放电的放电时程(burst duration,BD)、放电间期(burst interval,BI)、放电频率(burst frequency,BF)和积分幅度(integrated amplitude,IA)的变化。结果如下:在ZnPP-9组,与给药前相比,BD缩短、BI缩短、BF增加、IA降低(P<0.05)。在外源性CO组,与给药前相比,BD缩短、BI延长、BF降低、IA增大(P<0.05)。在Hemin组,与给药前相比,BI缩短、BF加快、IA降低(P<0.05),BD无明显改变(P>0.05)。在ZnPP-9+Hemin组,与给药前相比,BI缩短、BF加快(P<0.05),BD和IA无明显改变(P>0.05)。ZnPP-9+Hemin组与ZnPP-9组相比或ZnPP-9+Hemin组与Hemin组相比,BD、BI、BF和IA均无显著差异(P>0.05)。上述结果表明,内源性CO在节律性呼吸活动的中枢性调控中具有重要作用。 在停止hemin灌流并恢复单纯ACSF灌流后,hemin的作用并未消失,其原因可能是hemin未被洗脱。因此我们以相对吸光度为指标,对脑片hemin进行相对含量测定,观察脑片是否残留有hemin。 实验分为4个组(n=6/组):空白对照组、单纯ACSF对照组、经洗脱Hemin组(Heminl组)和未经洗脱Hemin组(Hemin2组)。结果如下:空白对照组和单纯ACSF对照组脑片hemin的相对吸光度无显著性差异(p>0.05);Heminl组和Hemin2组脑片hemin的相对吸光度显著高于空白对照组和单纯ACSF对照组(P<0.01);Heminl组和Hemin2组脑片hemin的相对吸光度无显著性差异(P>0.05)。 上述结果表明,hemin的作用未消失是因为hemin未被洗脱。
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