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目的部分原发性肾病综合征(idiopathic nephrotic syndrome,INS)具有异质性和多因性,临床研究发现部分INS与儿童特应性疾病具有共同的临床特征:如发作具有季节性,病情反复时依赖糖皮质激素治疗等。Th1/Th2细胞功能失调、Ig E异常升高及白三烯通路的激活在多种特应性疾病中发挥着重要作用。因此我们推测部分INS可能与特应性疾病具有某些相似的发病机制,它可能是一种Th2活化促进Ig E异常升高介导的特应性疾病,白三烯通路的激活可能参与部分INS的发病。本研究通过构建阿霉素肾病模型,检测Th1/Th2细胞因子、Ig E及1型半胱氨酰白三烯受体(Cys LT1R)在阿霉素肾病中的表达变化并予白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠干预治疗,探讨部分INS是否与特应性疾病具有相似的发病机制并观察孟鲁司特钠的干预效果,为临床孟鲁司特钠在部分INS中的应用提供理论基础及实验依据。方法1、Th1/Th2细胞因子、Ig E及Cys LT1R在阿霉素肾病大鼠中表达变化研究随机将48只雄性SD大鼠分为2组:(1)正常对照组(Sham组,n=24);(2)阿霉素肾病模型组(ADR组,n=24)。每组分别于第2、4、6、8周末留取血液、24h尿液后各处死6只并留取肾脏组织标本。通过双缩脲比色法进行24小时尿蛋白(24h UPro)定量;通过溴甲酚绿法检测血清中白蛋白(ALB)含量;通过酶法检测甘油三酯(TG)及胆固醇(Cho L)含量;通过HE染色及透射电镜下观察肾脏病理变化;通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定外周血Th1/Th2分泌的主要细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-2、IFN-γ)及Ig E表达水平;通过实时荧光定量(q RT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western-blot)检测肾组织中Cys LT1R表达水平。探讨Th1/Th2细胞因子、Ig E及Cys LT1R在阿霉素肾病大鼠中的表达变化。2、药物干预治疗研究随机将24只成功构建的阿霉素肾病模型大鼠分为4组:(1)泼尼松组(ADR+P组,n=6);(2)孟鲁司特钠组(ADR+M组,n=6);(3)泼尼松联合孟鲁司特钠组(ADR+P+M组,n=6);(4)生理盐水组(ADR+N组,n=6)。每组于药物干预治疗4周后留取血液、24h尿液后处死,并留取肾脏组织标本。通过双缩脲比色法进行24h UPro定量;通过溴甲酚绿法检测血清中ALB含量;通过酶法检测TG及Cho L含量;通过HE染色及透射电镜下观察肾脏病理变化;通过ELISA测定外周血Ig E及Th2分泌的主要细胞因子(IL-5、IL-10、IL-13)表达水平;通过q RT-PCR及Western-blot检测肾组织中Cys LT1R的表达水平。探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠对阿霉素肾病的干预作用。结果1、(1)实验第4周末成功构建阿霉素肾病模型,表现为24h UPro升高(24h UPro>100 mg/24 h)及外周血ALB降低,TG和Cho L升高;HE染色及电镜病理显示肾小球肿大,足细胞足突融合、消失,可见炎症细胞浸润。(2)成模后ADR组各时间点外周血Ig E及Th2分泌的主要细胞因子IL-5、IL-10、IL-13表达水平均明显高于Sham组(P<0.05),并且均随时间推移呈现增高趋势,第8周末达峰值,与同期Sham组比较均有显著差异(P<0.05),而IL-4、IL-2及IFN-γ与同期Sham组比较均无明显差异(P>0.05)。(3)成模后ADR组各时间点肾组织中Cys LT1R m RNA与蛋白表达水平均较Shan组增高(P<0.05),并维持于较高水平。(4)ADR组相关性分析:24h UPro定量与外周血中Ig E、IL-5、IL-10、IL-13表达水平及肾组织中Cys LT1R m RNA相对表达量均呈明显正相关;24h UPro定量与外周血中IL-4表达水平无明显相关性;肾组织中Cys LT1R m RNA相对表达量与外周血中Ig E表达水平呈明显正相关。2、给予相应药物治疗4周后发现:(1)ADR+P、ADR+M和ADR+P+M组24h UPro、TG和Cho L降低,ALB升高,其中ADR+P+M组表达变化最明显(P<0.05);(2)HE染色及电镜病理显示ADR+P、ADR+M和ADR+P+M组肾组织病变较ADR+N减轻,其中ADR+P+M组病变最轻;(3)ADR+P、ADR+M和ADR+P+M组血清中Ig E和IL-13表达水平均较ADR+N组降低(P<0.05),其中ADR+P+M组降低最显著(P<0.001);IL-5表达水平在ADR+P及ADR+M中较ADR+N组无明显变化(P>0.05),而在ADR+P+M组(P<0.05);IL-10表达水平在ADR+P和ADR+P+M组均较ADR+N组降低(P<0.01),但是在ADR+M组无明显变化(P>0.05);(4)ADR+P、ADR+M和ADR+P+M组肾组织中Cys LT1R m RNA与蛋白表达水平均较ADR+N组降低(P<0.05),其中ADR+P+M组降低最为显著(P<0.001)。结论1、阿霉素肾病存在Ig E异常升高,提示阿霉素肾病可能是一种Ig E异常升高介导的特应性疾病,Th2细胞活化是其发病机制之一。2、白三烯通路的激活参与阿霉素肾病的发生及发展。3、白三烯受体拮抗剂孟鲁司特钠联合激素干预治疗后可使阿霉素肾病肾组织病变程度减轻,有效抑制病程的进展。