论文部分内容阅读
近年来随着有生物活性的能够进行多突触传递的嗜神经示踪病毒的发现、改造与应用,有关调控内脏功能的中枢核团定位和功能认识得以深化,相关中枢核团之间的神经解剖学通路变得更加明晰。本研究运用伪狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)转突触示踪技术和荧光标记技术试图确定中枢神经系统参与调控小鼠肾脏功能的相关神经核团,以及这些核团之间的神经解剖学投射通路。研究方法与结果方法:将嗜神经示踪病毒PRV-614注入19只成年雄性C57BL/6J小鼠的左侧肾脏上极,按照动物的不同生存期限无痛处死后制备冰冻切片,用荧光免疫组织化学技术检测脊髓、脑干(延髓和中脑)中PRV-614感染神经元、色氨酸羟化酶(TPH)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的表达。结果:1.PRV-614经小鼠肾脏注射后第3d,少量的PRV-614感染神经元逆行示踪标记在脊髓T9的IML区。2.注射PRV-614后第4d,少量的PRV-614感染神经元发现在脊髓T8-10的IML区、IC区和CAN区,以及延髓头端腹外侧核。3.注射PRV-614后第5d,较多的PRV-614感染神经元发现在脊髓T7-12的IML区、IC区和CAN区等,延髓头端腹内侧核、延髓头端腹外侧核、延髓中缝核、孤束核、A5区域、蓝斑核及亚蓝斑核等;较少的PRV-614感染神经元发现在中脑PPTg和LDTg区等。4.注射PRV-614后第6d,在脊髓几乎未发现PRV-614感染神经元。较多的PRV-614感染神经元发现在延髓头端腹内侧核、延髓头端腹外侧核、延髓中缝核、A5区域、蓝斑核及亚蓝斑核等,以及中脑PPTg和LDTg区。其中PRV-614感染神经元主要发现在LDTg头端和中间部位,以及PPTg中部和尾部。PRV-614/TPH双重标记神经元主要分布在LDTg头端,而PRV-614/TH神经元分散在LDTg中在3个部位。PRV-614/TPH和PRV-614/TH神经元主要位于PPTg (cPPTg)尾侧。研究总结1.从小鼠肾脏注射的PRV-614经突触逆行传递到达中枢核团具有时空表达特异性。2.主要调节肾脏交感神经活性的脊髓节段范围可能是T8-10,其中T9尤为重要。3.延髓头端腹外侧核是主要调节肾脏TH阳性交感神经活性的中枢核团,而延髓中缝核是主要调节肾脏TPH阳性交感神经活性的中枢核团。4.脑桥中A5区域、蓝斑核及亚蓝斑核是主要调节肾脏TH阳性交感神经活性的中枢核团。5. LDTg头部和PPTg尾部均参与肾脏TH/TPH阳性交感神经活性的调节。