论文部分内容阅读
目的:大量研究证实，炎症参与结肠癌的发生发展过程，并可以直接影响肿瘤组织的血管生成。一方面，炎症存在于肿瘤微环境中，促进肿瘤细胞的增殖、迁徙和存活。另一方面，肿瘤微环境中的炎症反应是肿瘤免疫反应的一个重要因素，特异性免疫应答能够决定肿瘤病理中的炎症是促进肿瘤生长或是抑制肿瘤作用。本研究探讨采用酶联免疫吸附(ELISA)方法分别检测52例原发性结肠癌患者和结肠腺瘤患者外周血IL-17表达水平、并用免疫组化方法检测foxp3和IL-6在结肠癌患者组织以及癌旁组织(距肿瘤边缘5 cm)中的表达。探讨白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)和叉头状/翅膀状螺旋转录因子(foxp3)在结肠癌组织中的表达及临床意义。
方法:
1.选择2010年3月-2012年6月沧州市中心医院结肠癌患者手术标本52例，并于术前采血。患者术前均未接受放化疗，其中中-高分化腺癌34例、低分化腺癌18例。另收集10例大肠腺瘤标本作为对照。
2.采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测52例原发性结肠癌患者和结肠腺瘤患者外周血IL-17表达水平。
3.免疫组织化学Envision二步法，检测foxp3和IL-6在结肠癌患者组织以及癌旁组织(距肿瘤边缘5 cm)中的表达。进一步研究结肠癌中foxp3和IL-6的表达与临床病理特征的关系及它们之间的相互关系。
4.统计学处理:采用SPSS18.0软件包进行统计学处理。计数资料采用百分比表示，组间比较采用X2检验;P＜0.05(双侧)被认为检验有显著差异。
结果:
1.结肠癌患者外周血中IL-17水平（9.1±2.3）ng/ml明显高于结肠腺瘤（6.2±1.4)ng/ml,P＜0.05。见table1
2.Foxp3阳性细胞在远癌正常组织、腺瘤、癌旁（距癌5cm）和癌内组织均有表达，但以癌旁(距癌组织5cm)，特别是癌内组织明显，而远癌的正常组织及腺瘤很少表达(Fig.1)，大部分的foxp3阳性细胞呈现典型的T细胞和巨噬细胞的形态特点，foxp3阳性细胞在癌巢内或癌巢周围的炎性细胞浸润区域表达明显(Fig.2)。阴性对照为连续切片的一抗用正常山羊血清代替（同型对照），未见棕黄色的染色。结肠癌患者组织Foxp3阳性细胞数均显著多于腺瘤对照组和癌旁对照组(P＜0.05)。癌旁对照组foxp3阳性细胞数高于腺瘤对照组，有统计学意义(P＜0.05)。见table2
3.Foxp3表达与结肠癌临床病理因素的关系:Foxp3表达水平的高低与肿瘤病理分级有关:中高分化腺癌与低分化腺癌(P＜0.05)。见table4
4.IL-6蛋白表达的比较在结肠癌组织中，以均应弥漫性分布为主，在间质中的表达以围绕肿瘤周围的成纤维细胞、平滑肌细胞及炎性细胞染色较深，远离肿瘤区域染色相对较浅，呈弥漫性分布。癌组织（Fig.4）的染色明显深于癌周围间质，腺瘤对照组大部分阴性表达（Fig.3）。腺瘤对照组、癌旁对照组及结肠癌中阳性表达率分别为10％,19.23％和90.38％，呈逐渐增高趋势。结肠癌患者组织IL-6均显著高于腺瘤对照组和癌旁对照组(P＜0.05）。见table3
5.IL-6表达与结肠癌临床病理因素的关系: IL-6表达水平的高低与肿瘤病理分级有关:中高分化腺癌与低分化腺癌(P＜0.05)。见table4
6.不同肿瘤病理分级结肠癌患者:高中分化腺癌6.9±1.8高于低分化腺癌9.4±2.1，但在统计学上无显著差异，P＞0.05。见table4
7.Foxp3表达与结肠癌临床病理因素的关系:Foxp3表达水平的高低与肿瘤病理分级有关:中高分化腺癌与低分化腺癌(P＜0.05)。见table4。
结论:
1.结肠癌患者血液中IL-17蛋白的表达明显高于结肠腺瘤组，且随肿瘤分化程度的降低表达升高。
2.肿瘤组中IL-6和Foxp3阳性表达的细胞明显高于结肠腺瘤组和癌旁组织，尤以肿瘤组织周围表达最为明显;随肿瘤分化程度的降低表达升高。提示肿瘤组织中Foxp3的阳性表达与肿瘤微环境的免疫抑制密切相关。
3.结肠癌患者血液中IL-17蛋白的表达与肿瘤组织中IL-6和Foxp3阳性表达成明显正相关，提示在结肠癌患者中，作为TH17细胞所分泌的效应分子IL-17，其水平与局部肿瘤组织的免疫状态密切相关，联合检测IL-17、IL-6、Foxp3有助于进一步了解肿瘤患者的免疫状态，为肿瘤的免疫治疗提供基础资料。