用于食品和饲料中己烯雌酚检测的传感器研究

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己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)是动物养殖业中一种常见的医用激素类药物,但不允许作为饲料添加剂加以使用。由于己烯雌酚具有促进动物生长的作用,目前它被大量非法用于动物饲料中,这种非法使用已对食品安全构成了严重威胁。所以,饲料或动物性食品中己烯雌酚的检测及监控就显得尤为重要。虽然目前已有许多DES的检测方法,但这些方法都存在诸如检测过程繁琐、检测速度慢、仪器昂贵、检测结果可靠性差等不足之处,难以对DES进行准确、快速、高效的检测。为了及时有效地检测药物残留、保障食品安全,研究并建立方便、快捷、灵敏的DES检测方法无疑十分重要。 本研究尝试以传感方式来检测DES,设计了两种不同类型的DES传感器:电化学传感器和免疫生物传感器,其中重点研究了后者。在免疫生物传感器的研究中,分别以葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(CAT)作为标记酶,开发了两种DES免疫生物传感器。 电化学传感器的研究结果表明,在0-8.4 mg/L的浓度范围内,DES氧化峰电流与其浓度之间呈线性关系,R=0.99906,最低检测限为0.12 mg/L,可用于DES含量高的样品(如:饲料)的检测;干扰试验发现,除了一些DES结构类似物外,其它物质几乎不对测试产生干扰;使用此方法对样品中添加的DES进行了测定,平均回收率为97.0%,RSD为1.36%。此法与其它检测方法相比较,最大的优点是操作简便、检测速度快和检测成本低廉。 免疫生物传感器的研究是基于竞争酶免疫反应原理,通过检测连接到抗体膜上的酶量来间接确定DES的量。在实验中分别使用了CAT和GOD来标记DES,以CAT作为标记酶时,用过氧化氢测定仪检测过氧化氢的减少量(CAT作用于过氧化氢所导致)来推算酶量进而确定样品中DES的量。结果表明,DES浓度在8-600 μg/L的范围内呈线性关系,R=-0.99387,最低检出限可达7.76 μg/L,回收试验的平均回收率为103.6%,RSD为4.99%;以GOD作为标记酶时,是直接检测酶与底物反应过程中的电化学信号来确定酶量,在此试验中还利用辣根过氧化物酶(HRP)进行了二次酶促反应用以使反应信号得到放大,结果表明,在0.1-8.1 μg/L的浓度范围内呈线性关系,R=-0.99881,最低检出限为0.073 μg/L,回收试验的平均回收率为98.0%,RSD为3.67%。使用这两种标记酶制作传感器均获得了很好的检测效果,传感器具有很好的抗干扰能力,灵敏度和重现性也都很好。这也表明,免疫生物传感器用于检测DES是可靠的。 本文建立的DES传感器分析方法的意义主要表现在:(1)具有快速、灵敏、可靠、高效等优点,因而具相当的实用性;(2)免疫生物传感器在国内外尚未见报道,因此本文使用的工作原理可为其它物质检测传感器的研制提供借鉴。
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