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目的:观察TNF-α诱导后星形胶质细胞JNK及MCP-1表达的影响。进一步观察姜黄素对TNF-α诱导后星形胶质细胞JNK及MCP-1表达的影响，为该药临床应用提供实验基础和理论依据。
方法:将SD新生2d大鼠大脑皮层进行原代星形胶质细胞培养，第三次传代后神经胶质酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色法鉴定星形胶质细胞纯度。将培养星形胶质细胞分为正常组、姜黄素5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1和80μmol·L-1组，采用MTT检测不同浓度下姜黄素对星形胶质细胞生长抑制率的影响。选出姜黄素的最佳剂量。另培养星形胶质细胞将其分为6组:正常组(C组)、TNF-α组（T组）、TNF-α+姜黄素组（Cur5组、Cur10组、Cur20组）、TNF-α+溶剂对照组（D组）。C组不给予任何药物处理;T组培养基加入20ng·ml-1TNF-α，作用2h; Cur5组、Cur10组、Cur20组分别在给予20ng·ml-1TNF-α前给予5、10、20μmol·L-1姜黄索，提前孵育24h;D组在给予20ng·ml-1TNF-α前给予1μl·ml-1二甲基亚砜(DMSO)，提前孵育24h。用免疫组化和ELISA方法检测MCP-1蛋白表达量的变化。用免疫印迹方法检测JNK蛋白表达量的变化。
结果:
1.形态学变化原代培养的星形胶质细胞经传代后，纯度较高，并随逐渐传代更加纯化，形态也逐渐变化。星形胶质细胞胞体较大、很扁，形态不规则，胞质较丰富，细胞核呈圆形或卵圆形，常偏于胞体的一侧，内有1～2个核仁。培养至20d左右，细胞生长状态良好，铺满培养瓶底部并融合成单层，形成大致均一的扁平细胞层。
2.细胞纯度鉴定星形胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定，在荧光显微镜下镜检，GFAP标记阳性者呈绿色荧光，阳性率达95％以上，即大多数为星形胶质细胞。
3.MTT法检测星形胶质细胞生长情况星形胶质细胞的生长抑制率与姜黄素的浓度存在依赖性，呈反比关系。当姜黄素浓度分别为40μmol·L-1和80μmol·L-1时，对细胞生长有明显影响。因此，剔除40μmol·L-1和80μmol·L-1的两个浓度。
4.MCP-1表达的变化A、免疫组化:MCP-1在C组中少量表达，T组中MCP-1表达明显升高。姜黄素药物干预后，与T组相比，Cur5组和Cur(1)0组MCP-1表达差异无统计学意义，而Cur20组MCP-1表达有所下降。D组和T组之间差异无统计学意义。
B、ELISA:与C组相比，T组MCP-1表达明显升高。给不同剂量的姜黄素后，与T组相比，Cur5组和Cur10组MCP-1表达无显著差异，而Cur20组MCP-1表达有所下降。与T组相比，D组MCP-1表达也无显著差异。
C、免疫印迹:与C组相比，T组JNK表达明显升高。给不同剂量的姜黄素后，与T组相比，Cur10组JNK表达有所下降(P＜0.05)。与T组相比，D组JNK表达也无显著差异。
结论:TNF-α诱导后星形胶质细胞JNK及MCP-1表达上调。姜黄素可抑制TNF-α诱导后星形胶质细胞MCP-1的表达，且浓度20μmol·L-1时抑制率最大。浓度10μmol·L-1时姜黄素可抑制TNF-α诱导后星形胶质细胞JNK的表达。