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第一部分脱氧雪腐镰刀菌烯醇致小鼠精子损伤的作用机制
试验Ⅰ脱氧雪腐镰刀菌烯醇致小鼠的急性及亚急性毒性作用
目的:研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对小鼠的急性和长期毒性及免疫毒性作用。
方法:根据改良K(a)rber法取小鼠60只，随机均分为6组，5剂量组（按等比级数增减设置，相邻两剂量比值为1∶0.8）和空白对照组，测定了DON的急性毒性，确定LD50，再根据LD50将小鼠随机分为对照组、0.15（低）、0.6（中）、2.4（高）mg/kg.bw3个DON处理组（n=12），连续灌胃4周，观察小鼠体重、采食量、脏器指数、病理组织学、血液学指标等变化。
结果:DON对小鼠的LD50=3.3mg/kg，长期毒性试验的中剂量和高剂量组的小鼠体重和采食量显著低于对照组和低剂量组（P＜0.05）;高剂量组肝脏和肾脏指数显著高于对照组和低剂量组（P＜0.05），而脾脏指数却显著低于对照组和低剂量组（P＜0.05）;高剂量组肝脏表面有白色坏死灶，肝细胞间质出现红细胞浸润;肾脏明显肿大，肾小管结构不完整，肾小球萎缩。高剂量组LY％显著下降（P＜0.05）;MO％、GR％和HCT显著升高(P＜0.05);其他生理生化指标没有显著性差异。
表明:2.4mg/kg.bw DON对小鼠具有一定的毒性作用，肝脏、肾脏是DON主要的毒性靶器官。
试验Ⅱ DON致BALB/c小鼠精子损伤的作用机理研究
探讨雄性BALB/c小鼠暴露DON对睾丸、精子的损伤及其作用机制。将30只小鼠随机分为对照组组、DON毒素组（2.4 mg/kg·bw），连续灌胃30天，检测DON对睾丸、精囊腺指数，精子活力、活率，精子、睾丸形态结构，睾丸组织氧化应激指标ROS、SOD、MDA、GSH含量和JNK、c-Jun蛋白表达，以及细胞凋亡因子caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bim和Bid mRNA表达的影响。
结果显示:与对照组相比，DON组小鼠的精囊腺指数降低(P＜0.05)，精子活力、活率分别显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。DON组精子结构出现头部顶体缺失，中段线粒体鞘脱落，尾部弯曲、双尾、双头畸形等变化;超微结构显示精子顶体结构不完整，质膜不完整，线粒体排列不规则、有空泡、线粒体鞘变薄。睾丸组织呈现曲细精管生精上皮变薄，细胞排列不规则，精子细胞少见。此外，睾丸组织中ROS和GSH含量显著提高(P＜0.05)，JNK、c-Jun蛋白表达量显著提高(P＜0.05)，p-JNK、p-c-Jun表达也显著提高（P＜0.01或P＜0.05）。同时，Bim、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-9等的mRNA水平显著提高（P＜0.01或P＜0.05）。结果表明:DON致精子活力、活率下降，形态结构损伤，其机制主要是DON致睾丸组织ROS和GSH含量升高，从而引起氧化应激，通过JNK/c-Jun途径激活细胞色素c/Caspase-3线粒体凋亡通路来诱导生精细胞凋亡，进而导致精子生成障碍、畸形率增加，生殖能力降低。
第二部分蛋鸡对碳酸氢钠的耐受性研究
试验Ⅰ碳酸氢钠对蛋鸡生产性能和血液学指标的影响
为探讨碳酸氢钠(NaHCO3)在蛋鸡生产中的安全剂量范围，本试验旨在研究日粮添加不同水平NaHCO3对蛋鸡生产性能和血常规指标、血清生化指标及血气指标的影响。选取900只21周龄海兰褐蛋鸡，随机分为对照组和1、5、25、50 g/kg NaHCO3添加组，每组设6个重复，每个重复30只鸡，试验持续10周。
结果表明:饲料NaHCO3的添加水平不高于5 g/kg时不影响蛋鸡的生产性能（P＞0.05）。等于或高于25 g/kg时，蛋鸡饮水增加、排水样粪便严重，精神委靡，死亡率显著增加（P＜0.05）。肺部出现呼吸毛细管的融合，肾小球萎缩，近曲、远曲小管管壁变薄，脾脏白髓数量增加，肝脏出现坏死灶，肝细胞间隙增大、细胞萎缩。蛋鸡的产蛋率、采食量、产蛋重和平均蛋重显著或极显著降低（P＜0.05或P＜0.01），软破壳蛋率显著提高（P＜0.05）。此外，血液pH、二氧化碳分压、HCO3-浓度、碱剩余、总二氧化碳浓度随NaHCO3添加水平的提高均有逐渐增加的趋势，除添加1 g/kg时的血液pH、二氧化碳分压与对照组无显著差异（P＞0.05）外，其他均显著或极显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。然而，日粮添加NaHCO3不影响血液红细胞数量、白细胞数量以及血清碱性磷酸酶活性、总蛋白浓度、白蛋白浓度、总胆红素浓度、谷草转氨酶活性和谷丙转氨酶活性(P＞0.05)。但添加水平为25～50g/kg时，血液红细胞压积和总血红蛋白浓度及血清尿素氮和肌酐浓度显著或极显著提高（P＜0.05或P＜0.01），血清葡萄糖浓度显著降低(P＜0.05)，同时添加水平为50 g/kg时血小板数量显著低于其他各组(P＜0.05)。由此可知，日粮添加NaHCO3超过25 g/kg，蛋鸡生产性能下降、血气指标改变，生理功能紊乱。而当NaHCO3添加量低于5 gg/kg时，蛋鸡可维持正常的生产性能和血液学稳态。这提示在蛋鸡生产中饲料添加剂NaHCO3的安全剂量应低于5g/kg。
试验Ⅱ日粮添加碳酸氢钠对蛋壳质量的影响及其作用机制
探讨日粮添加碳酸氢钠（NaHCO3）对蛋壳质量、蛋壳钙、血钙浓度、钙调激素水平以及蛋壳腺中Ca2+转移相关蛋白基因表达的影响。选取900羽21周龄海兰褐蛋鸡随机分为对照组和1、5、25、50 g·kg-1 NaHCO3添加组，每组6个重复，每个重复30羽，持续10周。结果显示:与对照组相比，日粮添加1g·kg-1和5 g·kg-1NaHCO3对蛋壳质量不产生显著影响（P＞0.05）。25和50 g·kg-1组蛋壳钙含量显著降低（P＜0.01），蛋壳重、厚度降低（P＞0.05），50 g·kg-1组蛋壳强度和血清Ca2+浓度亦显著降低(P＜0.05)。此外，随着NaHCO3添加量的增加，25和50 g·kg-1组血液维生素D(VD)水平显著增加（P＜0.05或P＜0.01），蛋壳腺中瞬时性受体电位通道香草精受体6(TRPV6)、钙结合蛋白(CaBP-D28k)、钠-钙交换蛋白(PMCA1b)和质膜钙离子ATP酶通道(NCX1)mRNA表达量显著提高(P＜0.05)，50 g·kg-1组碳酸酐酶(CA)mRNA水平显著降低（P＜0.05）。
结果表明:日粮添加NaHCO3≤5 g·kg-1不影响蛋壳质量;而当添加量≥25 g·kg-1，蛋壳质量下降，其机制可能是过量的NaHCO3添加导致血液Ca2+浓度降低、CA表达量降低，致使蛋壳腺Ca+转移受阻，蛋壳钙含量减少、质量下降。其次，低血钙和高VD水平使TRPV6、CaBP-D28k、PMCA1b和NCX1等基因表达增加，推测钙离子跨细胞转运途径在蛋壳腺中起补充转移作用。
试验Ⅲ日粮添加碳酸氢钠对蛋鸡肠道菌群多样性的影响
探讨日粮添加不同浓度碳酸氢钠（NaHCO3）对蛋鸡粪便水分、pH值和盲肠微生物菌群数量和结构的影响，从而确定蛋鸡对饲料添加剂NaHCO3的耐受剂量。900羽21周龄海兰褐蛋鸡随机分成5组，每组6个重复，每个重复30羽。分别在基础日粮中添加0、0.1、0.5、2.5、5％NaHCO3，持续10周。
结果显示:与对照组相比，0.1％组蛋鸡盲肠乳酸菌数量增加，大肠杆菌数量降低，菌群多样性指数提高（P＞0.05）。0.5％组蛋鸡粪便pH值显著提高（P＜0.05），乳酸菌数量增加，茵群多样性指数提高(P＞0.05)。2.5、5％组蛋鸡粪便pH值、水分含量极显著高于其他组(P＜0.01)。同时，2.5、5％组盲肠乳酸杆菌数量降低（P＞0.05或P＜0.05），大肠杆菌数量增高（P＞0.05或P＜0.05），5％组茵群多样性指数亦显著降低前三组（P＜0.05）。结果表明:日粮添加NaHCO3超过2.5％,蛋鸡腹泻严重，肠道茵群平衡严重破坏。而当NaHCO3的添加量低于0.5％时，肠道有益菌数量和菌群多样性指数呈增加趋势，蛋鸡生产性能维持正常。因此，本研究提示蛋鸡生产中饲料添加剂NaHCO3最高耐受量为0.5％。