新疆和湖北不同人群KSHV流行病调查及K15诱导血管新生的相关信号通路研究

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卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV),即人疱疹病毒8型(HHV-8),是近年来于KS(卡波氏肉瘤)病损组织中发现的一种新型疱疹病毒。HHV-8是卡波氏肉瘤(Kaposis sarcoma,KS)、原发性渗出性淋巴瘤(Pfimary effusion lymphoma,PEL)及多中心卡氏病(Multicentric Castlemans disease,MCD)的病原体。本研究对KSHV检测方法和流行病学以及致病机理等方面开展了一些研究。   以BCBL-1细胞的KSHV DNA作为模板,克隆ORF65C、ORF73C和ORFK8.1γ等片段。利用原核表达载体pQE-80L和大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达了融合His的重组病毒蛋白ORF65C、ORF73C和ORF K8.1γ蛋白。通过Ni2+亲和层析获得高纯度的ORF65C、ORF73C和ORF K8.1γ蛋白。利用这些蛋白作为抗原建立和优化了血清学检测KSHV的ELISA方法。   利用已建立血清学检测方法,调查了新疆伊犁地区37份HIV阳性人群血清、2228份普通人群血清、湖北武汉地区560份普通人群血清、湖北公安地区698份普通人群血清和公安地区702份血吸虫病人血清的KSHV流行病情况。结果表明:新疆地区KSHV感染率要高于湖北,有明显地域差别。维吾尔族、哈萨克斯坦族和回族等民族KSHV阳性率高于新疆和湖北汉族人群(20.7%vs19.9%vs16.8%vs15.8%vs9.5%);新疆HIV-1人群KSHV抗体阳性率为43.2%,普通人群为19.2%;湖北武汉地区普通人群9.5%,公安地区普通人群为6.6%,血吸虫病人为8.4%。在男性人群中,血吸虫感染与KSHV抗体阳性率存在相关性(OR3.170.95%CI1.501-6.694,P=0.002)。两个地区的KSHV亚型均为A亚型。   研究了K15的两个等位基因K15P和K15M及其突变体对Ang-2转录活性的影响与相关的信号通路。研究结果表明:K15P和K15M均可激活Ang-2的表达,其中K15P的激活能力较K15M强。而K15P的481位氨基酸和K15M的490位氨基酸突变后,诱导Ang-2的表达水平下降,提示K15激活Ang-2的表达依赖于激活相关信号通路。K15通过激活TRAF2和Ras途径,进一步激活JNK和MEK途径从而提高核内转录因子AP-1和Ets-1的活性,从而提高Ang-2启动子的活性和转录水平。
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