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背景结直肠癌（CRC）是世界范围内女性和男性中最常见的致命癌症。2020年,CRC死亡率排名第二,发病率排名第三。MEK1/2抑制剂Binimetinib是一种丝裂原活化蛋白激酶1/2（MEK1/2）抑制剂,目前处于Ⅲ期临床研究中。细胞凋亡是发生在大多数多细胞生物中高度调控的细胞死亡的正常生理过程。细胞凋亡主要有两种途径:外源性死亡受体途径和内源性线粒体凋亡途径。早期研究发现MEK1/2抑制剂Binimetinib通过内质网应激信号通路诱导结肠癌细胞发生凋亡,但是MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导细胞发生凋亡的具体机制有待进一步研究。目的探讨MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导结肠癌细胞发生凋亡的具体作用机制,验证MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药5-FU、TRAIL对结肠癌细胞的影响。为临床治疗结肠癌提供了新的治疗思路。方法1、使用不同浓度的MEK1/2抑制剂Binimetinib处理结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2,流式细胞术检测线粒体膜电位的改变2、使用不同浓度的MEK1/2抑制剂Binimetinib处理结肠癌细胞HCT-116、CaCo2,WB检测内源性凋亡途径中相关蛋白的表达改变。3、使用不同浓度的MEK1/2抑制剂Binimetinib处理结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2,WB检测凋亡蛋白Cleaved caspase-8表达量4、使用CCK8检测MEK1/2抑制剂Binimetinib对shcaspase-8结肠癌细胞HCT-116、CaCo2生长的影响。5、使用WB检测MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导sh Caspase-8结肠癌细胞中凋亡相关蛋白Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3表达情况。6、使用不同浓度的MEK1/2抑制剂Binimetinib处理结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2,QPCR检测死亡受体相关RNA的表达量。7、使用不同浓度的MEK1/2抑制剂Binimetinib处理结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2,WB检测诱导DR5蛋白的表达量。8、干扰DR5,使用CCK8检测MEK1/2抑制剂Binimetinib抑制结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2生长的情况。9、干扰DR5,使用WB检测MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2中DR5、Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3蛋白的表达量。10、MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU,使用CCK8检测结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2的生长情况。11、MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU,使用流式细胞术检测结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2的凋亡率。12、MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU,使用WB检测结肠癌细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3的表达情况。13、构建裸鼠结肠癌皮下瘤,MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU治疗裸鼠皮下瘤。结果1.不同浓度MEK1/2抑制剂Binimetinib不能引起结肠癌HCT-116、Ca Co2线粒体膜电位的改变2.不同浓度MEK1/2抑制剂Binimetinib不能诱导结肠癌细胞内源性凋亡途径中相关蛋白的表达改变。3.MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导结肠癌细胞凋亡蛋白Cleaved caspase-8表达量增加4.MEK1/2抑制剂Binimetinib抑制shcaspase-8结肠癌细胞生长的能力减弱。5.MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导sh Caspase-8结肠癌细胞中凋亡相关蛋白Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3能力减弱。6.MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导死亡受体信号通过中DR5的RNA表达量增加。7.MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导DR5蛋白表达量增加。8.干扰DR5,MEK1/2抑制剂Binimetinib抑制结肠癌细胞生长的能力减弱。9.干扰DR5,MEK1/2抑制剂Binimetinib诱导结肠癌细胞中DR5、Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3蛋白的能力减弱。10.MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU抑制了结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2存活。11.MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU诱导结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2凋亡率增加。12.MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU诱导结肠癌细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-3表达增加。13.MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药TRAIL、5-FU抑制了裸鼠皮下瘤的生长。结论MEK1/2抑制剂Binimetinib不通过线粒体途径诱导结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2凋亡。MEK1/2抑制剂Binimetinib通过死亡受体DR5来诱导结肠癌细胞HCT-116、Ca Co2凋亡。MEK1/2抑制剂Binimetinib联合化疗药5-FU、TRAIL抑制结肠癌细胞生长的能力增强,诱导结肠癌细胞发生凋亡的能力增强。体外功能试验验证了MEK1/2抑制剂Binimetinib分别联合化疗药5-FU、TRAIL抑制了裸鼠的皮下瘤生长。为临床治疗结肠癌提供了新的治疗思路。