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目的: 探究胆固醇对Hras12V转基因小鼠肝肿瘤发生发展的影响。 方法: 应用Hras12V转基因肝癌小鼠模型，探究胆固醇对Ras癌基因诱导肝肿瘤发生发展中的影响。 1.采集8月龄C57BL/6J小鼠的正常肝组织(Wt)和Hras12V转基因小鼠的肝肿瘤组织(T)及肿瘤周围组织(P)，HE染色进行病理学诊断。 2.采用酶偶联比色法检测肝组织和血清中胆固醇和胆汁酸的含量。 3.蛋白质印迹法检测信号分子的表达和活化水平，RT-qPCR法检测基因的表水平。 4.胆固醇灌胃法处理Hras12V转基因小鼠，观察胆固醇对肝肿瘤发生发展的影响。 结果: 1.Hras12V癌基因在转基因小鼠P和T中第次显著增高。Hras12V小鼠肝肿瘤呈黄白色，HE染色显示肝肿瘤细胞大泡性脂肪变性，提示其脂质代谢紊乱。 2.胆固醇检测结果表明，与Wt相比，Hras12V转基因小鼠的P和T中的胆固醇水平明显升高(p＜0.05)，并且Hras12V转基因小鼠血清中的胆固醇含量也显著高于非转基因小鼠(p＜0.001)。虽然T中Hras12V癌基因的表达显著高于P(p＜0.001)，但T中的胆固醇水平却显著低于P(p＜0.01)。 3.胆汁酸检测结果表明，与Wt相比，Hras12V转基因小鼠的P和T中的胆汁酸水平显著降低(p＜0.05)，且胆汁酸合成关键酶CYP7A1、CYP27A1和CYP8B1的mRNA和蛋白水平显著降低。 4.胆固醇灌胃处理Hras12V转基因小鼠的实验结果表明，与对照组相比，胆固醇灌胃显著提升了小鼠血清和肝肿瘤中的胆固醇水平(p＜0.05)。虽然胆固醇处理组的肝肿瘤总数以及肝结节＜2mm)和肝腺瘤(2-5mm)的数量没有显著差别(p＞0.05)，但肝癌(＞5mm)的数量却显著降低(p＜0.05)。于此相一致，灌胃组小鼠的肝重和肝体重比显著降低(p＜0.05)。 5.胆固醇灌胃处理Hras12V转基因小鼠后，RT-qPCR检测结果表明，对照组和灌胃组的血清白蛋白(Albumin)和Hras12V转基因的mRNA表达水平没有发生显著变化。蛋白质印迹法检测结果表明，与对照组T相比，灌胃组T中:含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase3，Caspase-3(35KDa)的蛋白水平明显降低，而cleaved-Caspase3(17KDa)的蛋白水平明显升高;B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl2)的蛋白表达水平明显降低;糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3beta,GSK-3β)、β-链蛋白(β-chain protein，β-Catenin)、磷酸化蛋白激酶(Phosphorylationextracellular regulated protein kinases，p-ERK)的蛋白表达水平没有发生明显变化。 结论: 1.Ras癌基因的表达不仅在肝肿瘤细胞，而且在正常肝细胞中显著抑制了胆固醇代谢限速酶Cyp7a1、Cyp8b1和Cyp27a1的表达，进而抑制胆汁酸的合成，导致胆固醇的积蓄并显著提升血清中的胆固醇水平。 2.过剩的胆固醇对肝肿瘤的发生没有明显影响，但显著抑制了肝肿瘤的发展。