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本文以猪鼻骨为原料,提取天然Ⅱ型胶原蛋白,并以碱性蛋白酶酶解获得胶原肽。以天然Ⅱ型胶原蛋白和胶原肽为研究对象,分析天然Ⅱ型胶原蛋白和胶原肽的理化性质,并对其在小鼠体内抗关节炎作用机理进行研究。课题的研究对于类风湿性关节炎的预防具有重要意义。通过单因素试验及响应面分析得到Ⅱ型胶原蛋白最佳提取工艺为:NaCl浓度为2.5mol/L,提取时间为30h,提取温度为15℃,蛋白提取得率为22.58%,胶原蛋白含量为82.86%,所提胶原蛋白粗提物纯度较高。通过对Ⅱ型胶原蛋白理化性质测定,蛋白分子量大于300KD,230nm下有胶原蛋白特征吸收峰,符合胶原蛋白性质。通过碱性蛋白酶酶解获得胶原肽,胶原肽分子量小于20KD, HPLC-MS分析显示不存在未降解的大分子蛋白片段。通过构建CIA动物模型,研究Ⅱ型胶原蛋白及其胶原肽的体内抗关节炎作用得到以下结论:Ⅱ型胶原组小鼠关节指数为2,关节变形率为30%,胶原肽组小鼠关节指数为3,关节变形率为70%;Ⅱ型胶原组小鼠关节软骨破坏程度较低,胶原肽组关节软骨出现明显退化。说明口服Ⅱ型胶原能够达到抗关节炎作用,胶原肽不具有此作用。通过对给药组小鼠免疫器官及免疫细胞研究得到以下结论:天然Ⅱ型胶原蛋白能够显著增加小鼠胸腺指数(P<0.05)、降低小鼠脾脏指数(P<0.05);提高巨噬细胞吞噬能力(P<0.05)和淋巴细胞增殖能力(P<0.05),说明其对免疫系统具有一定的保护和恢复作用。通过对小鼠血清中细胞因子的检测,结果表明Ⅱ型胶原蛋白能够有效降低机体内IL-17(P<0.05)、MMP-3(P<0.01)和TNF-α (P<0.05)的水平,提高IL-10(P<0.05)的水平。同时,Ⅱ型胶原能够降低机体受损伤程度和氧化程度,从而达到抗关节炎作用。试验结果表明胶原肽不具有此效果,因此其不具有抗关节炎作用。