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目的：研究脐带沃顿胶间充质干细胞(wharton’s jelly mesenchymal stem cells, WJCs)对重型再生障碍性贫血(severe aplastie anemia, SAA)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3基因表达水平的影响,探讨WJCs对SAA患者T淋巴细胞(T lymphocytes, TLCs)免疫调节作用的可能机制。方法：采用胶原酶消化法从人脐带中分离培养WJCs,通过流式细胞术检测其表面标记并进行鉴定；采用密度梯度离心法及尼龙棉柱法从SAA患者外周血中分离TLCs;在植物凝集素(phytohemagglutinin, PHA)刺激下,将SAA患者TLCs(1×105个)进行体外培养,实验组加入不同数量级WJCs(1组：1×103个、2组：1×104个、3组：1×105个)共培养,3d后采用MTT (methyl thiazolyl tetrazolium)法检测淋巴细胞抑制率；流式细胞仪检测实验组及正常对照组SAA患者TLCs中CD4+CD25+T细胞比例的变化；逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测实验组及正常对照组SAA患者TLCs中Foxp3基因mRNA水平的变化。结果：(1)传代至第3代的WJCs形态呈长梭形的典型改变,流式细胞术检测WJCs细胞表面抗原,结果显示高表达CD166、CD29、CD13、CD44,低表达CD34、CD45、HLA-DR,综合分析结果经过培养传代所获得细胞确为间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)。(2) WJCs与SAA患者的TLCs按1：1(1组)、1：10(2组)、1：100(3组)的比例,混合培养72h后,实验组与对照组比较,TLCs的增殖受到不同程度的抑制,抑制率分别为62.9±11.9%、44.84±9.6%、2.64±7.2%,三组间比较存在明显差异(均P<0.05),1组抑制作用最强,2组次之,3组几乎无抑制作用。提示WJCs对TLCs增殖的抑制作用呈细胞剂量依赖性。(3)实验组WJCs与TLCs共培养72h后,其CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞百分率较对照组显著升高(P<0.05)；其百分率分别为22.46±3.05%、18.35±2.78%、11.88±1.54%,WJCs浓度越高,CD4+CD25+T细胞比例升高越明显,WJCs各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。WJCs可提高SAA病人CD4+CD25+T细胞比例,且提高程度与WJCs数量呈剂量依赖性。(4)实验组WJCs与TLCs共培养72小时后,SAA患者TLCs Foxp3 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.01),Foxp3 mRNA表达水平分别为1.75±0.21、1.07±0.14、0.63±0.11。实验组WJCs浓度越高Foxp3 mRNA表达水平升高越明显,WJCs各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。WJCs可提高SAA病人Foxp3 mRNA表达水平,且与TLCs增殖水平呈负相关。结论：采用胶原酶消化法可以从人脐带中分离培养WJCs, WJCs对SAA患者TLCs的抑制作用呈剂量依赖性,WJCs通过上调Foxp3的表达而发挥CD4+CD25+调节性T细胞的免疫调节作用,这可能是其发挥免疫抑制作用的重要机制之一。