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目的:1、大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的分离及培养,并鉴定其相关生物学特性;2、建立阿霉素肾病大鼠模型;3、检测生化指标,电镜观察,应用普通PCR和Western blot技术观察骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠的干预作用及mTOR的表达。方法:1、提取、培养与鉴定SD大鼠骨髓间充质干细胞---通过大鼠淋巴细胞分离液得到单个核细胞层,再通过密度梯度离心法和贴壁筛选法,不断传代、扩增,并通过流式细胞仪鉴定表面标志物质、同时运用成骨及成脂诱导方法鉴定骨髓间充质干细胞生物学特性;2、大鼠阿霉素肾病模型建立---非麻醉状态下尾静脉一次性按7.5mg/Kg体重注射盐酸阿霉素,14天后,综合各项结果:一般表现,24h尿蛋白定量、肌酐等各项生化指标,结合肾脏组织HE染色及电镜观察大鼠阿霉素肾病模型;3、骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠的干预作用及mTOR的表达---实验分组:模型组;MSC组;正常对照组;应用普通PCR和western blot技术动态观察足细胞裂孔膜蛋白nephrin及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR不同时间点mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果:1、大鼠BMSCs细胞易于分离、培养,而且具有间质细胞的表面抗原特征,纯度高,活性高及多向分化潜能;2、注射盐酸阿霉素14天后,综合各项结果判定本方法建立大鼠阿霉素肾病模型成功,可以实验;3、干预后各时间点,PCR检测模型组nephrinmRNA表达量均下降,随时间推移下降越明显,干细胞干预后nephrinmRNA表达量出现上升(较模型组),但相对于正常组仍然下降,Western blot检测nephrin同上。干预后1周及3周,Western blot表明模型组mTOR条带稍微增粗,p-mTOR条带模型组也增粗,且经干细胞干预后条带变窄,但相对正常组仍然变宽。灰度值出现相应变化,干预后2w,Western blot表明模型组mTOR条带稍微增粗,p-mTOR条带模型组增粗较明显,且经干细胞干预后条带变窄窄,但相对正常组仍然变宽。灰度值出现相应变化.结论:1、可以通过密度梯度离心法结合贴壁筛选法,成功地从大鼠骨髓中分离出高纯度、高活性和具有多向分化潜能的大鼠骨髓间充质干细胞;2、可以经尾静脉一次性按7.5mg/Kg体重注射盐酸阿霉素,建立大鼠阿霉素肾病模型,时间为14天;3、MSC保护阿霉素肾病大鼠的可能机制是:MSC的输注抑制了肾组织mTOR信号通路的激活,通过维持足细胞裂孔膜蛋白nephrin的稳定进而维持足细胞裂孔膜结构的完整,改善了蛋白尿,保护了因阿霉素导致的肾小球足细胞的损害,达到了延缓疾病进展的目的。