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实验目的 芳香化酶(又称芳香化酶细胞色素P-450,即P-450arom)是雌激素生成的关键酶,雌激素通过与雌激素受体(ER)结合产生效应,孕激素受体(PR)必须由雌激素作用才能合成,故芳香化酶、ER、PR均与雌激素有密切的关系。所以本实验通过检测在正常卵巢、卵巢浆液性乳头状囊腺瘤以及卵巢浆液性乳头状囊腺癌中芳香化酶、ER、PR的分布及表达,来探讨三者与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的发病机制、临床分期、分化程度的关系以及芳香化酶与ER、PR之间是否具有相关性,进而探讨其临床意义。 实验材料与方法 1.材料:选择中国医科大学第一附属医院1995年至2002年手术切除的卵巢浆液性乳头状囊腺癌标本36例作为实验组,所有这些患者病理资料完整,术前未行放疗、化疗,年龄17-67岁,平均47.75岁;其中高分化10例,中分化13例,低分化13例;Ⅰ期3例,Ⅱ期8例,Ⅲ期20例,Ⅳ期5例。同时选择卵巢浆液性乳头状囊腺瘤20例及非卵巢疾患患者正常卵巢组织标本10例作为对照组,年龄分别为17-42岁,平均26.4岁;40-53岁,平均47.2岁。所有病理均经病理科专家证实,临床分期依据国际妇产科联盟(FIGO)1986年修订的卵巢恶性肿瘤分期标准。 2.方法:用免疫组织化学SABC法检测芳香化酶的表达情况,即所有组织均经4%的甲醛固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,每张切片经常规脱蜡、水化,3%过氧化氢去除内源性过氧化物酶,染芳香化酶切片需经热修复抗原,滴入非免疫性动物血清封闭。滴加一抗P-450arom(1:300),4℃湿盒内过夜,冲洗后切片再加1滴生物素标记的第二抗体,室温孵育30分钟后,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染色,常规脱水,透明树胶封片。用免疫组织化学二步法检测ER、PR的表达情况,即至热修复抗原,冷却,冲洗后滴加一抗,4℃湿盒内过夜,冲洗后滴加二抗,室温孵育30分钟。PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染色,常规脱水,透明树胶封片。用PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性切片作阳性对照。 3.统计学分析:计数资料采用SPSS 10 .0统计软件进行X“检验,P<0.05有统计学意义。实验结果 1.芳香化酶在三种组织中的表达主要位于细胞浆中,ER、PR在三种组织中的表达主要位于细胞核中。 2.芳香化酶在正常卵巢、卵巢浆液性乳头状囊腺瘤及卵巢浆液性乳头状囊腺癌组中的表达率分别为30%、40%、69%。芳香化酶在卵巢浆液性乳头状囊腺癌组中的表达率明显高于正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组(P<0.05),与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关(P>0.05),但随着癌分化程度的降低,芳香化酶的阳性率有逐渐升高的趋势。 3.ER在三组中的表达率分别为10%、25%、53%,在卵巢浆液性乳头状囊腺癌组中的表达率明显高于正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组(P<0.05),与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关(P>0.05),但随着癌分化程度的降低,ER的阳性率有逐渐降低的趋势。 4.PR在三组中的表达率分别为80%、80%、42%,在正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组中的表达率明显高于卵巢浆液性乳头状囊腺癌组(P<0.05),与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关(P>0 .05),但随着癌分化程度的降低,PR的阳性率有逐渐降低的趋势。 5.芳香化酶与ER、PR间没有相关性(P>0.05)。结论 1.芳香化酶主要定位于细胞浆中,芳香化酶在卵巢浆液性乳头状囊腺癌组中的表达率明显高于正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组,与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关,但随着癌分化程度的降低,芳香化酶的阳性率有逐渐升高的趋势。 2.ER主要定位于细胞核中。ER在卵巢浆液性乳头状囊腺癌组中的表达率明显高于正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组,与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关,但随着癌分化程度的降低,ER的阳性率有逐渐降低的趋势。 3 .PR主要定位于细胞核中。PR在正常卵巢组及卵巢浆液性乳头状囊腺瘤组中的表达率明显高于卵巢浆液性乳头状囊腺癌组,与卵巢浆液性乳头状囊腺癌的临床分期和分化程度无关,但随着癌分化程度的降低,PR的阳性率有逐渐降低的趋势。 4.芳香化酶与ER、PR间无相关性。