【摘 要】
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目的：观察中草药连翘乙醇提取物(FS-3)对人胃癌SGC-7901细胞的体外增殖抑制和诱导凋亡作用，明确FS-3对人胃癌SGC-7901细胞的影响，以期拓展FS-3的抗肿瘤谱，为FS-3的进一步研究提供
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目的：观察中草药连翘乙醇提取物(FS-3)对人胃癌SGC-7901细胞的体外增殖抑制和诱导凋亡作用，明确FS-3对人胃癌SGC-7901细胞的影响，以期拓展FS-3的抗肿瘤谱，为FS-3的进一步研究提供实验基础。 方法：通过双蒸水水煮提取(FS-1)、乙醇沉淀(FS-2)、大孔吸附树脂柱层析(FS-3)，分离、提取连翘抗肿瘤活性成分。通过观察细胞形态，计算细胞病变程度(CPE)来定量判断连翘提取物各部分的肿瘤细胞增殖抑制大小，筛选抗肿瘤有效部位。通过MTT比色法观察FS-3不同作用时间(6h、12h、24h)和不同作用剂量(100μg/mL、75μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL FS-3)对SGC-7901人胃癌细胞的生长、增殖抑制情况，并计算IC50来定量测定FS-3对的SGC-7901细胞的细胞毒性。通过AO/EB双荧光染色法整体上定性的判断经FS-3作用后SGC-7901细胞的凋亡情况、借助透射电镜观察经FS-3作用后SGC-7901细胞的微观形态学变化。通过琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞特征性DNA条带。通过流式细胞仪测定不同浓度的FS-3作用后细胞的凋亡率。 结果：采用肿瘤细胞增殖抑制作用作为导向的化学分离方法，从中药连翘中分离提取得到连翘抗肿瘤活性成分(FS-3)。FS-3体外可显著抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长与增殖，而这种抑制作用随着FS-3剂量的增加与作用时间的延长而增加，即具有剂量和时间依赖性。FS-3对SGC-7901细胞作用6h、12h、24h的半数抑制浓度(IC50)分别为(73.27±3.19)μg/mL、(44.63±2.06)μg/mL、(35.99±2.43)μg/mL。AO/EB双荧光染色与透射电镜观察到FS-3作用后，SGC-7901人胃癌细胞大多出现典型凋亡细胞形态、透射电镜(TEM)结果表明SGC-7901胃癌细胞在FS-3处理后出现典型凋亡细胞形态改变。DNA裂解片段凝胶电泳分析，FS-3作用组出现明显“阶梯状”条带。流式细胞仪(FCM)分析结果表明，SGC-7901胃癌细胞在FS-3处理前后细胞凋亡率发生改变，其中溶媒对照组为(0.73±0.49)％，25μg/mL、50μg/mL和100μg/mL的FS-3作用组的细胞凋亡率分别为(8.04±0.68)％、(18.45±0.83)％和(52.37±0.74)％，各组间差异有显著性(P<0.05)，表明FS-3对SGC-7901细胞的诱导凋亡作用呈现明显的浓度依赖性。 结论：从连翘中分离提取到连翘抗肿瘤活性成分FS-3对人SGC-7901胃癌细胞的增殖有抑制作用，且其抑制作用呈现剂量-时间依赖关系。连翘抗肿瘤活性成分FS-3可在体外诱导人SGC-7901细胞凋亡。
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