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目的：探讨<99>Tc直接标记带有10个连续组氨酸的磷脂结合蛋白(Annexin V)重组体(His10-Annexin V)的可行性，研究其在正常小鼠体内的生物分布和药代动力学：探讨<99>Tc-His10-Anncxin V及单光子发射计算机断层显像(SPECT)探测非小细胞肺癌(NSCLC)化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性，确定较理想的凋亡显像时间窗；建立一种无创伤性的细胞凋亡体内显像方法，实时监测化疗后肿瘤细胞凋亡程度，早期预测和评价非小细胞肺癌化疗效果，有助于肿瘤患者治疗方案的个体化。
方法：直接标记法制备<99>Tc-His10-Anncxin V，纸色谱法测产物放化纯、胶体含量、体外稳定性及健康小鼠体内的生物分布，DAS2.0软件拟合计算其药代动力学参数。建立荷H460非小细胞肺癌裸鼠模型，分为紫杉醇诱导化疗后24h、48h、72h及未化疗对照组共4组，每组5只。尾静脉注射<99>Tc-His10-Annexin V 0.5 mCi(18.5MBq)，2h、4h、6h后行SPECT显像，勾画6h时肿瘤和对侧正常肌肉组织(T/NT)感兴趣区(ROI)，计算T/NT值。将<99>To-IgG显像作为对照，以确定肿瘤的非特异性摄取。显像后处死裸鼠，取出肿瘤称重并测定放射性计数，计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g)。原位末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数，流式细胞术(FCM)定量分析活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)。采用SPSS12.0统计软件，行单因素方差分析，肿瘤组织放射性摄取与活化caspasc-3及TUNEL法凋亡指数作直线相关分析。
结果：标记产物放化纯可达(98.01±1.67)％，3h后放化纯仍可达(95.45±1.34)％，胶体含量为(3.31±1.37)％。肾脏对该示踪剂摄取最高，且清除缓慢，其次是骨骼，肝、脾、胃肠有少量分布，而脑基本不摄取。血药浓度-时间曲线符合二室模型特征，分布相半衰期(T<,1/2a>)为(21.18±5.95)min，清除相半衰期(T<,1/2β>)为(69.32±0.10)min。注射后2h即可得到清晰图像，化疗组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚，随时间延长越来越浓，化疗后24h、48h、72h组6h的T/NT分别为2.63±0.76、3.41±0.90、3.85±0.62，对照组T/NT为1.42±0.19，明显低于化疗组(P<0.01)。化疗后24h、48h、72h肿瘤组织放射性摄取分别为(2.55±0.73)％ID/g、(3.60±1.09)％ID/g、(3.73±0.97)％ID/g，对照组肿瘤仅有少量放射性摄取，肿瘤放射性摄取为(1.09±0.18)％ID/g，明显少于化疗组(P<0.01)。<99>Tc-IgG显像示，化疗组和对照组肿瘤部位均未见明显放射性浓聚，T/NT分别为1.53±0.26、1.31±0.12(P=0.132>0.05)，肿瘤组织摄取分别为(1.19±0.12)％ID/g、(1.13±0.14)％ID/g(P=0.480>0.05)。对照组活化caspase-3为(3.70±0.74)％，紫杉醇诱导化疗后，大量caspase-3被激活，24h、48h、72h化疗诱导组分别为(23.46±2.23)％、(62.85±6.13)％、(70.44±6.09)％，三个化疗诱导组和未治疗组相比均有显著性差异(P<0.01)。活化caspase-3同T/NT具有很好的相关性(r=0.847，P<0.01)；与肿瘤放射性摄取亦有良好的相关性(r=0.774，P<0.01)。对照组肿瘤组织HE染色和TUNEL法可见数个散在凋亡小体，细胞轮廓完整包绕核碎片。化疗诱导后24h发生了片状或多灶性的细胞凋亡，HE染色见大量的核碎片、核固缩，TUNEL示大量黄染的凋亡细胞；48h，大片细胞发生凋亡；72h，绝大部分细胞已发生凋亡，仅血管腔周围有部分细胞存活，少量细胞出现核分裂相。对照组凋亡指数为(3.31±0.61)％，24h、48h、72h化疗诱导组凋亡指数分别为(32.90±6.64)％、(70.42±7.54)％、(83.23±9.71)％，化疗诱导组与对照组凋亡指数均有显著性差异(P<0.01)。TUNEL法凋亡细胞数同T/NT具有很好的相关性(r=0.833，P<0.01)；同肿瘤摄取放射性摄取亦有很好相关性(r=0.850，P<0.01)。
结论：His10-Annexin V易于<99>Tc直接标记，方法简便，体内、外稳定性较好，主要通过肾脏排泄，肝、脾摄取较低。非小细胞肺癌紫杉醇化疗后<99>Tc-His10-AnnexinV凋亡显像较理想的时间窗为48-72h，给药后2h即可得到清晰图像，可早期探测非小细胞肺癌化疗后细胞凋亡，并与FCM活化caspase-3及TUNEL法细胞凋亡指数呈直线相关。His10-Annexin V有望成为探测细胞凋亡的分子探针，进而早期预测和评价肿瘤疗效。