谷物中戊聚糖含量测定方法

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尽管戊聚糖在谷物中的含量较低,然而大量的科学研究表明戊聚糖含量对谷物的加工生产、品质鉴定以及遗传育种等方面具有较大的影响。由于谷物中戊聚糖的复杂性,目前戊聚糖含量的检测方法还没有统一的标准,导致不同的检测方法测定的结果之间没有可比性,给科学研究和生产实践带来诸多不便。因此,建立一个能准确测定谷物中戊聚糖含量的标准方法,不但可以规范和完善小麦等谷物品质评价标准体系,同时还可以促进戊聚糖在谷物育种以及食品加工研究中的发展。本课题针对当前谷物中戊聚糖含量检测方法不统一的问题,在参考国外标准和现有文献的同时结合企业和现有的实验条件,对所需试剂的配制方法以及测定条件的关键参数进行了优化,建议将优化后的地衣酚-盐酸法确定为最适合的应用在谷物中检测戊聚糖含量的农业行业标准方法,并选择五种具有代表性的谷物为原料,对这种方法的标准曲线、灵敏度、精密度、加标回收率、检出限和测定下限等建立方法的指标进行检验,实验结果表明:地衣酚-盐酸法是检测谷物中戊聚糖含量较为可行的方法。本实验结论如下:参照现有的测定谷物中戊聚糖的地衣酚-盐酸法,将试剂分别配制成4mol/L盐酸溶液、2mol/L盐酸溶液、1%FeCl3盐酸溶液和0.1%地衣酚-乙醇溶液。通过观察一周内溶液的稳定性得出:在室温(20℃)条件下,4mol/L盐酸溶液和2mol/L盐酸溶液一周内浓度较为稳定,可在一周内使用;1%FeCl3盐酸溶液对测定结果影响不大,也可在一周内使用;但是,0.1%地衣酚-乙醇溶液在一周内对测定结果影响较大,需要即配即用。以吸光度差为指标,通过单因素实验,研究测定条件的关键参数对实验结果的影响并优化实验参数,得出实验条件的最佳参数如下:酸解最佳时间为120min,酸解最佳温度为100℃,显色最佳时间为30min,显色最佳温度为100℃,测定样品的最佳时间是在样品显色后用冷水冷却至室温后进行,氯化铁-盐酸溶液的最佳浓度为0.1%;在优化测定条件的同时,本研究还拟定了标准操作步骤。为衡量检测方法的可靠性,本文对标准方法的各指标分别进行了检测,结论如下:本方法测定的标准曲线在样品中戊聚糖含量为40μg/mL200μg/mL之间时呈显著相关,重复条件下精密度为0.81%5.85%,再现条件下精密度为1.64%5.45%,加标回收率为84.75%104.98%,检出限和测定下限分别为19.16μg/mL和20.98μg/mL,这说明优化方法较准确。
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