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创伤是临床常见疾病,也是一个具有挑战性的难题。本课题通过静电纺丝技术,以聚乙烯醇（Polyvinyl alcohol,PVA）和壳寡糖（Chitosan oligosaccharides,COS）为载体材料,纳米银粒子（Silver nanoparticles,AgNPs）为抗菌药物,制备用于促进创面愈合的纳米纤维。其中,AgNPs的制备方法为化学还原法和紫外光照法。以溶液可纺性、电导率、加药量等为指标,筛选出抗菌纳米纤维的最佳处方:11%PVA和3%COS溶液体积比为2:1,加入药物质量分数为3%,紫外光照时间为8h。以扫描电镜观察自制PVA/COS/Ag NO3和PVA/COS-Ag NPs纳米纤维的形貌特征,得知纳米纤维平均直径为130-192nm。同时,用透射电镜、紫外、红外、X衍射等方法考察AgNPs的结构与存在形式,证明AgNPs在纳米纤维中平均粒径为15-22nm,AgNPs以范德华力与纤维物理性结合。综合透气性、溶胀率等实验结果,最终选用戊二醛处理48h的交联条件来制备纳米纤维。以纤维外观、透气性、药物含量为评价指标,进行加速试验,考察自制纳米纤维的稳定性,结果显示自制纳米纤维在加速3个月内外观、透气性等均无明显变化,稳定性良好。此外,本课题用原子吸收分光光度法考察自制纳米纤维的体外释放情况,结果显示样品在8h内释药迅速,pva/cos-agnp纳米纤维的最大释药量远远超过pva/cos/agno3纳米纤维。分析结果知,自制纳米纤维的释药过程是溶出、扩散与溶蚀结合进行。本课题对自制纳米纤维的安全性进行了初步评估,mtt结果显示,在0.81.0mg/ml浓度范围内,pva/cos-agnp纳米纤维比pva/cos/agno3纳米纤维安全性更高。新西兰大白兔单/多次给药刺激性评分结果证明,自制纳米银抗菌敷料无皮肤刺激性。体内外药效是评价药物制剂的重要指标之一,本课题以金葡菌和大肠杆菌为试验菌,考察体外抑菌效果,结果显示两种自制纳米纤维对金葡菌和大肠杆菌均有良好的抑菌作用,但pva/cos-agnp纳米纤维比pva/cos/agno3纳米纤维抑菌作用强。同时,利用spraguedawley大鼠皮肤创面模型,分别敷贴pva/cos/agno3纳米纤维、无菌纱布、pva/cos-agnp纳米纤维、市售创可贴,考察各种伤口敷料的体内抗炎及促愈效果。由结果得知,pva/cos-agnp纳米纤维组伤口愈合初期几乎无化脓感染现象;创可贴组感染情况较轻,而纱布组和pva/cos/agno3纳米纤维组出现发炎化脓现象,说明pva/cos-agnp纳米纤维抗感染能力比pva/cos/agno3纳米纤维更强,在愈合前期使用效果更佳。为探索自制纳米银抗菌敷料促进伤口愈合的分子机制,本课题建立spraguedawley大鼠皮肤创面模型,选用各方面性能较优的pva/cos-agnp纳米纤维以及特异性tgfβ1受体抑制剂sb431542,利用苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）、MASSON、免疫荧光染色、实时定量聚合酶连锁反应（Real-time quantity Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）、免疫蛋白印迹（Western blot,WB）等方法,初步考察了PVA/COS-AgNP纳米纤维的使用对TGFβ1/Smad信号通路相关因子的影响。结果显示,PVA/COS-AgNP纳米纤维可促进伤口的闭合和重建,抑制剂组出现化脓溃烂现象,并且愈合进程最慢;PVA/COS-AgNP纳米纤维能在创面愈合前期明显提高TGFβ1、TGFβRI、TGFβRII、COL I、COL III和FN的mRNA表达,同时使TGFβ1、COL I和COL III、磷酸化Smad2和Smad3的蛋白水平上调。相反在创面愈合前期TGFβ1/Smad信号通路受抑制时,上述基因和蛋白的表达也随之下调。综上,PVA/COS-AgNP纳米纤维对早期创面愈合的促进作用可能与TGFβ1/Smad信号通路的激活相关。