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文章从以下两部分就酸激活离子通道在小鼠急性心肌缺血中的作用及机制进行了综述。 第一部分心肌TRPV1通道在小鼠急性心肌缺血中的作用 目的:探讨小鼠心肌组织和细胞中是否存在TRPV1通道,并观察其在小鼠急性心肌缺血中的作用。 方法:结扎左冠状动脉前降支建立小鼠急性心肌缺血模型;应用Western Blotting、RT-PCR和免疫荧光等技术,观察TRPV1在正常心肌组织和细胞中的表达及其在缺血条件下表达的改变;采用TTC染色法检测对照组和TRPV1干预组缺血后心肌梗死面积和凋亡蛋白的改变。 结果: 1.Western Blotting、RT-PCR和免疫荧光结果均显示心肌组织和/或细胞有TRPV1表达。 2.结扎冠状动脉左前降支2h建立小鼠急性心肌缺血模型,用Western Blotting技术检测蛋白表达,结果显示:模型组心肌与对照(假手术)组心肌相比,其凋亡蛋白Bax与抗凋亡蛋白Bcl-2表达量的比值显著增加(以对照组比值为1,模型组比值为2.29±0.38,n=3, P<0.01);其TRPV1表达量也显著增加(以对照组表达量为1,模型组表达量为1.35±0.15,n=3, P<0.05)。 3.与 Western Blotting结果一致,免疫荧光结果提示急性缺血模型组小鼠心肌TRPV1标记物荧光强度增加(对照组荧光强度为11.69±1.66,模型组荧光强度为20.45±2.74;n=5,P<0.01),膜表达也明显增加。 4.缺血前5 min尾静脉注射TRPV1非特异性阻断剂capsazepine(CPZ)能显著减少缺血后梗死面积(模型+溶剂组梗死率为35.5±9.95％,CPZ组梗死率为14.9±4.51％;n=6,P<0.01),与模型组相比,其凋亡蛋白 Bax/抗凋亡蛋白 Bcl-2的比值显著减少(以溶剂+模型组的比值为1,CPZ组的表达比值为0.53±0.09,n=3, P<0.01)。 结论: TRPV1 mRNA和蛋白在心肌组织和心肌细胞均有表达,在急性缺血条件下其表达上调。阻断TRPV1能减少梗死面积,减轻缺血损伤。提示TRPV1参与小鼠急性心肌缺血性损伤。 第二部分心肌ASICs在小鼠急性心肌缺血中的作用 目的:进一步验证小鼠心肌组织是否存在ASICs(ASIC1、ASIC2a、ASIC3)通道;观察缺血前后表达的差异,并探讨其是否参与小鼠急性心肌缺血。 方法:结扎左冠状动脉前降支建立小鼠急性心肌缺血模型;Western Blotting、RT-PCR和免疫荧光等技术检测ASICs在正常心肌和缺血心肌中表达的改变。 结果: 1.RT-PCR和免疫荧光双标结果均显示心肌组织和/或细胞有ASICs(ASIC1、ASIC2a、ASIC3)表达。 2.Western Blotting结果显示,模型组心肌与对照(假手术)组心肌相比,ASICs(ASIC1、ASIC2a、ASIC3)表达并未发生明显改变。以对照组表达量为1,缺血后ASIC1表达量为1.03±0.17,n=4,P=0.72;ASIC2a表达量为1.07±0.19,n=6, P=0.39;ASIC3表达量为1.05±0.17,n=4,P=0.60。 3.ASICs与心肌标记物免疫荧光双标技术显示,急性缺血模型组小鼠心肌与对照组(假手术)心肌组织ASICs荧光强度无显著差异(ASIC1:对照组12.36±0.67,模型组12.19±0.78, n=5,P=0.72)、(ASIC2a:对照组11.81±0.64,模型组11.81±0.09,n=4,P=0.98)、(ASIC3:对照11.99±0.66,模型组12.51±0.47,n=3,P=0.33)。 结论: 小鼠心肌组织中存在ASICs(ASIC1、ASIC2a、ASIC3)表达;在急性缺血条件下,其蛋白表达和荧光分布均无明显改变。