调脂通脉颗粒对动脉粥样硬化兔模型炎症因子表达影响的研究

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研究背景:心脑血管病是危害人类健康的常见疾病。据卫生部统计,我国心脑血管疾病每年新发病例可高达700余万人,最新数据统计心脑血管疾病现有患者可达15000余万,给家庭和社会均造成沉重负担。近年来,心脑血管事件的发生呈现年轻化趋势。动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)是引发心脑血管疾病的重要因素,学者们通过临床研究和基础研究,并且从整体水平到器官水平、从细胞水平到分子水平的研究,揭示了动脉粥样硬化在心脑血管疾病中越来越重要的作用。现今,动脉粥样硬化是一种炎症性疾病已达成共识,而且,从这一角度出发治疗动脉粥样硬化可使动脉粥样硬化斑块稳定性增高。研究可使动脉粥样硬化斑块稳定性增加的因素对于预防起病急且常常无先兆的心脑血管事件是很重要的。中医药凭借其独特的治疗体系,在动脉粥样硬化易损斑块的逆转和消退中起到了一定的作用。目的:通过动物实验探讨调脂通脉颗粒对动脉粥样硬化兔模型血脂水平的影响、对相关炎症因子的影响、对AS斑块的稳定作用。动态观察调脂通脉颗粒的疗效及作用机理,为临床动脉粥样硬化的早期预防和治疗提供实验和理论依据。方法:采用喂食高脂饲料饮食和球囊拉伤颈总动脉的方法建立动脉粥样硬化兔模型,造模成功后,将模型动物随机分为3组,分别为模型组、调脂通脉颗粒治疗组(下简称中药组,7.3g/kg/d)、阿托伐他汀治疗组(下简称西药组,1.1mg/kg/d),加上喂食高脂饲料、只结扎不行球囊拉伤的假手术组、正常动物组,共5组。治疗组灌胃给药,模型组、假手术组、正常组灌胃等容量的蒸馏水。选择治疗后第6周、12周为观察点,在两个时间点行超声检测,实验开始、取材前行血脂测定。6周、12周时处死并取材,HE染色,通过电子显微镜观察动脉组织病理形态学,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清炎症因子C-反应蛋白(CRP)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素6、10、17(IL-6,10,17)水平,利用荧光定量PCR方法检测炎症因子mRNA表达情况。综合评价调脂通脉颗粒对动脉粥样硬化兔模型的影响。结果:(1)西药组和中药组均能明显降低动脉粥样硬化兔模型血清胆固醇、低密度脂蛋白(P<0.05)。(2)动脉组织病理形态:6周、12周两个时间点,模型组和假手术组可见斑块形成。与模型组相比,西药组和中药组可显著减轻动脉内膜的损伤,显微镜下仅可见少量的脂质沉着。(3)血清ELISA结果:不同时间点,模型组家兔血清CRP、IL-6、IL-17较假手术组明显升高(P<0.01),血清TGF-β、IL-10较假手术组明显下降(P<0.01)。中药组和西药组家兔血清IL-6、CRP、IL-17水平较模型组明显下降(P<0.01),血清TGF-β、IL-10水平明显升高(P<0.01),中药组与西药组未见明显差异。(4)荧光定量PCR结果显示,与假手术组比较,模型组兔动脉组织中CRP、IL-6、 IL-17的基因表达增加,有显著性差异(P<0.05)。与模型组相比,给药干预后中药组和西药组的CRP、IL-6、IL-17的基因表达有下降趋势,有显著性差异(P<0.05)。两者作用差异不明显。与假手术组比较,模型组动脉组织中的TGF-β、IL-10的mRNA含量呈下降趋势,差异有显著性(P<0.05)。与模型组相比,中药组和西药组的TGF-β、 IL-10的mRNA含量明显升高,有显著性差异(P<0.05)。结论:1、阿托伐他汀和调脂通脉颗粒可明显降低胆固醇、低密度脂蛋白,从而逆转动脉粥样硬化斑块病变,使斑块面积变小,稳定性提高。2、调脂通脉颗粒可减轻超声图像动脉斑块的大小,与组织病理学变化相一致。3、调脂通脉颗粒可通过血清炎性因子的调节,使模型兔动脉斑块组织中CRP、IL-6、 IL-17的mRNA表达下调,使IL-10、TGF-β的mRNA表达增加,减轻炎症因子对斑块的作用。
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